INVESTIGADORES
PERETTI Leandro Ezequiel
congresos y reuniones científicas
Título:
Látex Funcionalizados y Sensibilizados con Proteínas Recombinantes para detectar Toxoplasmosis por Inmunoaglutinación
Autor/es:
PERETTI, LEANDRO E.; GONZALEZ, VERÓNICA DG.; MARCIPAR, IVÁN S.; GUGLIOTTA, LUIS M.
Lugar:
Córdoba
Reunión:
Congreso; XVII Congreso Argentino de Fisicoquímica y Química Inorgánica; 2011
Institución organizadora:
AAIFQ
Resumen:
La Toxoplasmosis es una enfermedad causada por el parásito Toxoplasma gondii, que afecta gravemente a pacientes inmunodeprimidos y mujeres en gestación. Una de las formas de diagnosticarla es mediante la detección de anticuerpos específicos en el suero del paciente. La técnica de inmunoaglutinación resulta un método de diagnóstico interesante ya que es rápido, económico, y puede ser aplicado al pie del paciente. Objetivo Con el objetivo final de producir un kit de inmunoaglutinación para diagnosticar Toxoplasmosis, este trabajo describe la síntesis y sensibilización de partículas de látex con una proteína recombinante del T. gondii. Trabajo Experimental y Resultados Se sintetizaron partículas tipo core-shell con funcionalidad carboxilo. En una primera etapa se sintetizaron partículas de poliestireno (PS) mediante polimerización en emulsión batch de estireno, en presencia de emulsificante. Posteriormente, se realizó una copolimerización en emulsión batch de estireno y ácido metacrílico (AMA) sobre las partículas de PS sintetizadas previamente, en ausencia de emulsificante. Luego de su limpieza por desplazamiento de suero, se determinó el diámetro de las partículas por dispersión de luz dinámica: DLS (DDLS); la densidad de carga superficial y la densidad de grupos funcionales superficiales mediante titulación conductimétrica; y la concentración crítica de coagulación (c.c.c.) por agregado de KBr mediante el método visual y DLS (Tabla 1). Finalmente, el látex carboxilado fue sensibilizado por unión covalente con la proteína recombinante p35b del T. gondii (punto isoeléctrico teórico=5.94). Se trabajó con diferentes concentraciones de proteína inicial y diferentes pHs. Conclusiones · El uso de emulsificante en la síntesis de PS permitió obtener látex monodispersos, sin interferencia posterior. · El látex carboxilado es más estable (mayor c.c.c.) que el látex de PS, debido a la carga adicional negativa aportada por los grupos carboxilos superficiales. · La unión de la proteína fue mayor a pH=5, lo que podría deberse a que, a este pH, la misma tiene carga positiva y el látex tiene carga negativa, favoreciendo la atracción.
