OBTENCIÓN DE LA GLICOPROTEÍNA HN DEL VIRUS DE LA ENFERMEDAD DE NEWCASTLE EN LARVAS DE RACHIPLUSIA NU: SU POTENCIAL APLICACIÓN COMO INMUNÓGENO PARA POLLOS

CHIMENO ZOTH S.A; GOMEZ, E; CARBALLEDA, JM; TABOGA, O; CARRILLO, E; BERINSTEIN, A

Buenos Aires, Argentina

Congreso; IX Congreso Argentino de Virología.; 2008

Asociación Argentina de Microbiología

La glicoproteína hemaglutinina-neuraminidasa (HN) del virus de la enfermedad de Newcastle (NDV) constituye, junto con la glicoproteína de fusión (F), el principal antígeno de este patógeno aviar, causante de una enfermedad altamente contagiosa económicamente relevante. El objetivo del presente trabajo ha sido obtener la glicoproteína HN como antígeno recombinante en larvas de Rachiplusia nu infectadas con un baculovirus recombinante y evaluar su potencial aplicación como inmunógeno en pollos. Para ello, a partir de la región codificante para la proteína HN de NDV cepa La Sota, se construyó un baculovirus recombinante (AcNPV/HN), siguiendo protocolos de rutina. La expresión del antígeno de interés se evaluó, en primer lugar, en células Sf9 infectadas con AcNPV/HN, obteniéndose una proteína de peso molecular aparente acorde al esperado. Resultados similares se observaron al evaluar la presencia de la proteína HN en extracto de larvas de insecto inoculadas por vía intracuticular con el mencionado baculovirus. A fin de estudiar la capacidad inmunogénica del antígeno recombinante, se inmunizaron pollos White Leghorn libres de patógenos específicos de 15 días de edad con 2 dosis del inmunógeno recombinante constituido por extracto de larvas infectadas con AcNPV/HN formulado con adyuvante incompleto de Freund. Se tomaron muestras de sangre semanalmente y a los 28 días post inmunización los animales fueron sacrificados. La presencia de anticuerpos específicos contra NDV se evaluó en muestras de suero y de sobrendante de cultivo de intestinos y cecas, mediante ensayos de ELISA. Los resultados demostraron que el inmunógeno desarrollado a partir de la proteína HN obtenida de larvas infectadas con AcNPV/HN indujo una sólida respuesta inmune humoral no sólo en suero sino también en mucosas. Asimismo, el inmunógeno recombinante logró inducir la producción de anticuerpos séricos con actividad inhibidora de la hemaglutinación viral y actividad neutralizante, tal como se determinó mediante ensayos de seroneutralización en fibroblastos de embrión de pollo. Los resultados reportados en este trabajo demuestran la utilidad y posible aplicación de esta estrategia simple y económica en el diseño de vacunas contra NDV.