ESTUDIO DEL MECANISMO DE MORFOGÉNESIS DE ARENAVIRUS: DISECCIÓN MOLECULAR DE LA INTERACCIÓN ENTRE LA NUCLEOPROTEÍNA NP Y LA PROTEÍNA Z DEL VIRUS JUNÍN

ARMELLA SIERRA, ALICIA; LOUREIRO, EUGENIA; ESPERANTE, SEBASTIAN; BORKOSKY, SILVIA; GALLO, GIOVANNA; D'ANTUONO, ALEJANDRA; DE PRAT GAY, GONZALO; LÓPEZ, NORA

Congreso; XIII Congreso Argentino de Virología. VI Simposio de Virología Clínica. IV Simposio de Virología Veterinaria; 2021

Sociedad Argentina de Virología

El arenavirus Junín (JUNV) es el agente causal de la Fiebre Hemorrágica Argentina, una enfermedad endémica de la región central de nuestro país. Los arenavirus son virus envueltos, cuyo genoma está constituido por dos segmentos de ARN de cadena simple, llamados S y L. El segmento S codifica la nucleoproteína (NP) y el precursor de las glicoproteínas de envoltura. El segmento L codifica la ARN polimerasa, y la proteína matriz Z, que es esencial para la morfogénesis viral. Ambos segmentos genómicos se asocian estrechamente a moléculas de NP formando las nucleocápsides virales. Previamente, hemos demostrado in vivo que la interacción entre las proteínas Z y NP es importante para la incorporación de las nucleocápsides a las partículas virales, y que el dominio C-terminal de NP está involucrado en esta interacción. Asimismo, hay evidencia de la participación del dominio C-terminal de Z, pero los residuos involucrados no han sido completamente esclarecidos. Con el propósito de comprender el mecanismo de ensamblado de JUNV, en este trabajo se propuso: 1) Caracterizar la interacciónentre las proteínas NP y Z de JUNV in vitro y 2) Dilucidar los residuos de Z involucrados en la interacción. Para ello, se expresó, purificó y caracterizó el dominio C-terminal de la proteína NP de JUNV y se obtuvo la proteína Z de JUNV como fusión a Maltose Binding Protein (MBP). La interacción entre ambas proteínas fue analizada mediante ensayos de coprecipitación y retardo en geles de agarosa. Además, la interacción Z-NP fue evaluada en el contexto celular, mediante experimentos de inmunoprecipitación y microscopía confocal utilizando mutantes puntuales de Z. Los resultados, que sugieren que NP presenta actividad exonucleasa, no reportado previamente para JUNV, y que su dominio C-terminal interactúa directamente con Z, pueden contribuir a la identificación de nuevos blancos moleculares para el desarrollo de terapias específicas contra este grupo de virus.