EVALUACIÓN DE LA RESPUESTA DEL ESTROMA PULMONAR A LA INFECCIÓN INDUCIDA POR HELICOBACTER PYLORI EN UN MODELO EXPERIMENTAL EN RATÓN

ARISMENDI SOSA AC; SALINAS IBAÑEZ SN; PIGUILLEM S; FERRAMOLA FF; BIAGGIO VS; PEREZ CHACA MV; GOMEZ NN; ALARCON CAVERO AE; VEGA A

Congreso; Enfermedades infecciosas y microbiología clínica; 2015

Helicobacter pylori es uno de los patógenos humanos más comunes que coloniza selectivamente la mucosa gástrica y causa gastritis crónica, úlceras pépticas y cáncer gástrico. Si bien su nicho es el estómago, también se ha encontrado en saliva lo que permiten plantear un reservorio oral para el microorganismo. Estudios recientes sugieren una asociación epidemiológica entre la infección por H. pylori y varias patologías extragastroduodenales incluyendo enfermedades cardiovasculares, de la piel, reumáticas y respiratorias, tales como asma, bronquiectasia y enfermedad pulmonar obstructiva crónica; sin embargo el papel de H. pylori en esas patologías no está claro. El objetivo de este trabajo fue evaluar la presencia del microorganismo, los cambios morfológicos y la expresión de algunos mediadores inflamatorios, como resultado de la infección por H. pylori en el estroma pulmón. Los ratones fueron instilados de forma orotraqueal con 50 µl de una suspensión de concentración 1 × 108 unidades formadoras de colonias (UFC) por ml de una cepa de referencia de H. pylori. Después de 72 h de infección, los ratones fueron sacrificados, se realizó lavado broncoalveolar (LBA) y el pulmón fue asépticamente removido. Como control se usaron ratones no infectados instilados con solución fisiológica estéril. A partir del LBA se realizó la caracterización de las poblaciones celulares mediante tinción con Giemsa. La presencia de bacterias se determinó por recuento de colonias (UFC/ml) previa homogenización del pulmón en solución fisiológica y siembra en agar Mueller‑Hinton suplementado con sangre equina al 5%, incubación a 37°C en microaerofilia durante 72h. La extracción de RNA se realizó mediante técnica de Trizol a partir del tejido pulmonar. Se obtuvo el DNA copia por RT‑PCR y se evaluó expresión del gen factor de necrosis tumoral TNF‑a, usando como control de expresión el gen b‑actina. Los resultados obtenidos mostraron una recuperación de la bacteria en pulmón de 2,3 × 103 UFC/ml a las 72h de infección. En los ratones infectados se observaron focos de infiltración inflamatoria principalmente alrededor del árbol bronquial. En ese mismo sentido en los LBA se encontró un 85% de macrófagos, 10% de linfocitos y 5% de neutrófilos. El pulmón de ratones controles no mostró cambios histopatológicos y se observó 95% de macrófagos y 5% de neutrófilos en LBA. La respuesta inflamatoria mostró mayor expresión de TNF‑a, respecto al control. En conclusión; la colonización de H. pylori en el tejido respiratorio podría producirse a través de la aspiración de saliva y contenido gástrico en pacientes infectados crónicamente con la bacteria. En este trabajo se muestra por primera vez el efecto de H. pylori en pulmón utilizando un modelo experimental de ratón en el que la presencia del microorganismo estimula la activación de mediadores inflamatorios e induce la infiltración de células inflamatorias sugiriendo un posible papel de H. pylori en la patogenicidad de la infección en pulmón.