Modificaciones en la actividad de la proteína quinasa dependiente de calcio y calmodulina tipo II (CaMKII) en la evolución hacia insuficiencia cardíaca.

BECERRA R; SAID M; LUCCOTTI I; RINALDI G; MUNDIÑA- WEILENMANN C; MATTIAZZI A; VITTONE L.

La Plata

Congreso; XVIII Meeting ISHR Latin American Section; 2010

International Society for Heart Research, Latin American Section

Numerosas observaciones relacionan el aumento de actividad de la CaMKII con el desarrollo de insuficiencia cardíaca (IC), pero no hay estudios longitudinales que describan el estado de fosforilación de esta proteína (PCaMKII) como indicador de su actividad durante la evolución de la hipertrofia a la IC. Estudiamos en un modelo de rata sometida a sobrecarga de presión por constricción de la aorta torácica a través de la colocación de un clip (ratas Clip) y sus respectivos controles (ratas Sham), la relación entre la actividad de CaMKII y la disfunción contráctil. A distintos tiempos de coartación se evaluaron: parámetros hemodinámicos, morfológicos y la fosforilación de CaMKII y sus sustratos (PT17 de fosfolamban y PS2815 del receptor de rianodina). Luego de 4hs, 7 días y 3 meses (m) de la cirugía se exploró la función cardíaca a través de la cateterización del ventrículo izquierdo (VI) y se determinaron parámetros morfológicos. Se realizaron ensayos bioquímicos para evaluar la expresión y fosforilación de fosfolamban (PLN), del receptor de rianodina (RyR2) y de PCaMKII por electroforesis seguida de Western- Blot (n=3-8). Los datos hemodinámicos medidos revelan un aumento postquirúrgico inmediato de la presión desarrollada en el ventrículo izquierdo (VI) en Clip vs Sham (161,0±8.1 vs 116.1±4.1mmHg p<0.05), que persistió a los 7 días, sin cambios en otros parámetros. La hipertrofia del VI, se detectó en las ratas Clip a partir de los 7 días. A los 3 m las clip presentaban insuficiencia sistólica y diastólica con disminución significativa de +dP/dt (Clip: 2162.7±172.3 vs Sham: 4846.9±729.9 mmHg/seg), aumento de la presión diastólica final (Clip: 20.2±3.7 vs Sham: 5.6±0.7 mmHg) y de la constante de relajación Tau (Clip: 28.3±4 vs Sham: 12.2±1.6 ms). Se evidenció un aumento temprano (4 hs) de PCaMKII en Clip vs Sham (146.5±12.4% p<0.05) sin cambios significativos en la fosforilación de sus sustratos. A los 7 días PCaMKII retornó a valores basales coincidente con una caída de PS2815 de RyR2. A los 3 m en las ratas Clip, PCaMKII disminuyó por debajo de los valores basales (62.8±6.2% p<0.05), sin cambios en la fosforilación de sus sustratos. Los resultados muestran una misma dirección en los cambios en contractilidad y PCaMKII: aumento temprano de ambos (4 hs) y descenso a tiempos tardíos (3 m) y sugieren un mismo perfil de comportamiento para la actividad de fosfatasas.