MARCADOR ARSENICAL FLUORESCENTE PARA DETECCIÓN DE POBLACIONES APOPTÓTICAS EN CÉLULAS DE LEUCEMIA

A. LIS FEMIA; C. FACUNDO TEMPRANA; M. GRASSELLI; S. DEL V. ALONSO

Mar del Plata

Congreso; Reunión Anual SAIC - SAFIS ? AACYTAL; 2011

Sociedad Argentina de Investigación Clínica

Los compuestos de arsénico han demostrado utilidad médica, ya que probaron ser eficaces en la remisión completa de la leucemia promielocítica aguda. Si bien se ha informado que el efecto terapéutico se debe a la inducción de la apoptosis a través de la generación de radicales libres de oxígeno, el mecanismo involucrado en esta respuesta, no se conoce ni tampoco los posibles objetivos de estos compuestos in vivo. Por lo tanto, entender más sobre el modo de acción de arsénico en los sistemas biológicos es esencial y nuevas metodologías son necesarias para lograrlo. En este trabajo se describe la aplicación de un compuesto de arsénico marcado fluorescentemente, para ser utilizado con técnicas de fluorescencia en investigación básica y aplicada, centrado en estudios de apoptosis inducida por arsénico. El compuesto está formado por una molécula de ácido arsanílico unido covalentemente a una molécula de isotiocianato de fluoresceína (FITC). Fue previamente sintetizado químicamente y caracterizado por fluorescencia, espectrometría UV-Vis, de masas y FTIR. En este trabajo se evalúa su actividad apoptótica en comparación a trióxido de arsénico, una droga actualmente aceptada para el tratamiento de leucemia, así como sus propiedades fluorescentes en la línea celular HL60, un modelo de células de leucemia, mediante citometría de flujo. El compuesto resultó ser útil en la inducción de apoptosis en el modelo de leucemia elegido. El marcado fluorescente de las poblaciones celulares fue de tal manera que los mayores porcentajes de apoptosis correspondieron a la más alta fluorescencia FITC, que se correlaciona a la cantidad más alta de arsénico.