INVESTIGADORES
BARBIERI Elena Susana
congresos y reuniones científicas
Título:
Caracterización de nanoanticuerpos contra la proteína HA del Virus de Influenza A H1N1
Autor/es:
BARBIERI, E.S.; BAZTARRICA, J.; GARAICOECHEA, L.L.; PUNTEL, M.; BAUMEISTER, E.; WIGDOROVITZ, A.; PARREÑO, V.
Lugar:
CABA
Reunión:
Congreso; XI Congreso Argentino de Virología - II Congreso Latinoamericano de Virología; 2015
Institución organizadora:
Sociedad Argentina de Virología
Resumen:
Influenza tipo A es
un virus de la familia Orthomyxoviridae de genoma a ARN, de 8 segmentos. Debido
al rápido cambio genético y reasociación del genoma viral segmentado, las cepas
virales evolucionan continuamente y se hace necesaria la actualización de la
formulación de las vacunas para la producción. En la Argentina, la pandemia
H1N1 del año 2009 generó 1.390.566 personas infectadas y 617 muertes
reportadas. A pesar de la disponibilidad de vacunas y drogas anti-virales, los
efectos profilácticos y terapéuticos permanecen incompletos. Esto se debe, en
parte, al tiempo transcurrido entre que se detecta una cepa emergente y se
produce una vacuna eficaz frente a dicha cepa. Esto impide contar con las
herramientas para una protección inmediata para su aplicación en pacientes de
alto riesgo, es por esto que en este trabajo estamos presentando la posibilidad
de utilizar nano-anticuerpos contra una región conservada de la hemaglutinina
del Virus.
Los nano-anticuerpos (VHHs) son moléculas de un solo dominio, derivadas de
anticuerpos de tamaño (15kD) presente en la naturaleza capaz de reconocer a un
antígeno y son de muy alta afinidad, especificidad, estabilidad, y solubilidad.
Debido a la carencia de la porción Fc típicamente encontrada en las
inmunoglobulinas, estos anticuerpos no desencadenan respuestas celulares
tóxicas o mediadas por complemento. Además, su pequeño tamaño y similitud con
las inmunoglobulinas humanas los hace poco reactivos y aptos para su
administración en la mucosa del tracto respiratorio.
En el laboratorio de INCUINTA se han generado VHHs a partir de la inmunización
de una llama con una vacuna trivalente conteniendo cepas de influenza tipo A
H1N1, H3N2, y una cepa de tipo B. Por biopaneo, se seleccionaron 37 clones de
VHHs, de los cuales 22 reconocen por ELISA de fagos a la proteína recombinante
HA0 de la cepa viral H1N1 A/Puerto Rico 1934 y 15 reconocen al virus
correspondiente a un aislamiento argentino (H1N1 A/Argentina/017/2009). La
caracterización por secuenciación de los clones determinó que tres de los VHH
(A5A.1, D81.1, D91.2) poseerían un doble puente disulfuro en el domino CDR3, lo
cual redundaría en una mayor estabilidad de los mismos. Asimismo, se observó
que 5 de los 37 anticuerpos poseen actividad neutralizante in vitro frente a la
cepa A/Argentina/017/2009.Por otro lado, el clon G41.2 inhibe la
hemoaglutinación por esta misma cepa.
Los resultados mencionados indican que cinco clones son candidatos para su
utilización tanto en la profilaxis y tratamiento de la infección, para lo cual
se realizará la evaluación in vivo en un modelo murino, como también para el
desarrollo de un kit diagnóstico.