El bloqueo del TNF-alfa liberado por los macrófagos testiculares previene la apoptosis de las celulas germinales de ratas con orquitis autoinmune experimental

M. S. THEAS; S. JARAZO DIETRICH; P. JACOBO; L. LUSTIG

Mar del Plata

Congreso; LII Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2007

Sociedad Argentina de Inmunología. Sociedad Argentina de Investigación Clínica. Sociedad Argentina de Fisiología.

La orquitis autoinmune experimental (OAE) es un modelo de inflamación testicular caracterizado por la presencia de un infiltrado intersticial de macrófagos y linfocitos y apoptosis de las células germinales (CG). Dado que previamente demostramos que las CG apoptóticas expresan el receptor de TNF-alpha (TNFR) de tipo 1 y que el medio condicionado de macrófagos testiculares (MCMT) obtenido de ratas con OAE contiene TNF-alpha el objetivo de nuestro trabajo fue estudiar el efecto del MCMT sobre la apoptosis de las CG y determinar la participación del TNF-alpha en dicho proceso. La OAE fue inducida por inmunización activa con antígenos espermáticos y adyuvantes (grupo experimental, E), las ratas del grupo control (C) fueron inmunizadas sólo con adyuvantes. Los animales fueron sacrificados a los 30 días (d) (sin lesión), 50d (lesión focal) y 70d (lesión severa) posteriores a la primera inmunización. El MCMT obtenido de ratas E (MCMT/E) sacrificadas a los 50 y 70 d indujo in vitro apoptosis de las CG (% de CG TUNEL+, MCMT 50d: C:20.23, E: 60.42***; MCMT 70d: C:18.34, E: 59.78***, p=0.001 vs respectivo C, test de Chi2). El contenido de TNF-alpha en el MCMT/E fue significativamente mayor a los 70d vs el MCMT/C (TNF-alpha pg/ml, MCMT 30d C:62.55±16.91, E:66.55±11.07; MCMT 50d C:83.00±6.34, E:100.89±17.28; MCMT 70d: C:68.23±19.53, E:111.45±8.79*, p=0.05, tes t de Student). Para evaluar si el TNF-alpha presente en el MCMT participa en la apoptosis de las CG, éste fue neutralizado in vitro empleando una proteína formada por el TNFR y la porción Fc de una IgG (Etanercept, ET). El ET revirtió el efecto apoptótico del MCMT/E (% de CG TUNEL+, MCMT 70d C:24.66, E:39.88, E+ET:22.58***, p=0.001 vs E, test de Chi2). Los resultados indican que los macrófagos testiculares producen factores solubles que inducen apoptosis de las CG, siendo el TNF-alpha un factor importante ya que el bloqueo del mismo previene la apoptosis de las CG durante la fase severa de la OAE.