Regulación post-transcripcional del mRNA de las subunidades de la proteína quinasa A en Saccharomyces cerevisiae

CAÑONERO, LUCIANA; PAUTASSO, CONSTANZA; GONZÁLEZ BARDECI, NICOLÁS; GALELLO, FIORELLA; PORTELA, PAULA; ROSSI, SILVIA

CAPITAL

Workshop; Biología Celular y Molecular del ARN; 2018

Fundación Instituto Leloir

En S.cerevisiae la PKA, conformada por las subunidades TPK1, TPK2, TPK3 y BCY1, controla varios eventos celulares en respuesta a estímulos. La especificidad en la señalización cAMP-PKA es mantenida a distintos niveles de control, entre los cuales está la regulación de la expresión de las subunidades de PKA. Estudiamos la expresión de las subunidades de PKA frente al estrés térmico. El promotor de cada subunidad es diferencialmente regulado durante este estrés. El promotor de TPK1 es el único inducido, y además muestra un aumento de su mRNA en respuesta al estrés. El promotor de BCY1 posee bajo nivel de actividad, pero se mide alta abundancia del mRNA. El análisis de estabilidad de los mRNAs indica que la vida media del mRNA de BCY1 es mayor que la de TPK1, y que ambos son estabilizados durante el estrés térmico. Las secuencias 5? de las TPKs y de BCY1 afectan la estabilidad de sus mRNA. Los niveles de proteína Tpk1 no muestran un cambio significativo durante el estrés térmico pero sí aumentan cuando las células son sometidas a un segundo estrés. Analizando la localización in vivo del mRNA de TPK1 durante el estrés térmico, se visualizó que ese mRNA se acumula en focos de citoplasmáticos resistentes a cicloheximida. En conjunto, frente al estrés térmico, los mRNAs de las subunidades de PKA son expresados diferencialmente y son más estables; el mRNA de TPK1 es inducido y forma focos, indicando una posible regulación de la expresión a nivel de la localización del mensajero.