INTERACCIÓN ENTRE Pseudomonas aeruginosa Y Staphylococcus aureus EN PACIENTES CON DIAGNÓSTICO DE FIBROSIS QUÍSTICA

ROBALDI, STEFANIA; CASSANELL, MARTÍN; DIAZ APELLA, MATEO NICOLÁS; GALEANO, MARÍA BELÉN; PAUTASSO, CONSTANZA; BELLORA, N; PEREDA, ROSANA; CARDOZO, ANDREA; RIAL, MARÍA JOSÉ; SMITH, SILVINA; GONZALEZ, NORMA; SMANIA, ANDREA; TRIBELLI, PAULA M

CABA

Jornada; Jornada de Enfermedades poco frecuentes - EpoF; 2023

Los microorganismos se encuentran frecuentemente en comunidades con interacciones neutrales, mutualistas o antagonistas. En particular, Pseudomonas aeruginosa (PA) y Staphylococcus aureus (SA) son patógenos humanos oportunistas que pueden co-aislarse en distintas infecciones. Las infecciones pulmonares causadas por estas dos especies bacterianas son una de las principales causas de mortalidad y morbilidad en pacientes con dichas infecciones y las coinfecciones pueden modificar la virulencia y la resistencia a antibióticos lo cual lleva a un peor pronóstico para el paciente. La interacción entre SA y PA ha sido descripta como antagonista con un desplazamiento de SA por parte de PA, pero las infecciones in vivo han mostrado una interacción mas compleja que incluye la coexistencia y una cooperación en el metabolismo. Además durante la infección se seleccionan mutaciones patoadaptativas. Nuestra hipotesis es que durante el establecimiento de la infección por parte de S. aureus las mutaciones seleccionadas impactan en la interacción con P. aeruginosa y en el resultado de esta. Hemos establecido un reclutamiento de pacientes en el Hospital General de Niños Dr. Pedro Elizalde con la toma de muestras de 17 pacientes pediatricos con diagnostico de fibrosis quistica monoinfectados con SA o coinfectados PA-SA por 18 meses para el analisis de esta interacción. Durante los primeros 12 meses determinamos las caracteristicas fenotípicas de mas de 300 aislamientos de SA incluyendo actividad DNAsa, hemolisis, resistencia a antibioticos, expolisacáridos y competencia con P. aeruginosa PAO1. Hemos encontrado que PA se mantiene en las coinfecciones mientras que SA es desplazado de manera intermitente o no dependiendo del paciente. Para los casos de monoinfección con SA, hemos encontrado que la presencia de PA es variable. Nuestros primeros resultados mostraron que los aislamientos de SA en el punto inicial de muestreo de pacientes monoinfectados presentan una mayor producción de estafiloxantina y una mayor resistencia a la presencia de P. aeruginosa PAO1 que los aislamiento de pacientes coinfectados, mientras que la formación de biofilms fue similar en ambos grupos. Hemos elegido un paciente monoinfectado con SA que nunca ha mostrado infección por PA desde el comienzo del muestreo. En este paciente la actividad DNAsa, hemolisis y la competencia con P. aeruginosa PAO1 se mantiene estable a lo largo del tiempo, mientras que las producción de estafiloxantina ha incrementado. Además se ha realizado la secuenciación del genoma de uno de los clones de dicho paciente usando tecnología de nanopore. El tamaño del genoma fue de 2,98 y present deleciones y mutaciones puntuales en comparación con el genoma de una cepa de referencia. Nuestros resultados mostraron que el diseño de muestreo y la caracterización fenotipica son adecuados para el analisis de la interaccion de S. aureus y P. aeruginosa