Detección de heteroresistencia a vancomicina en bacteriemias por Staphylococcus aureus

DI GREGORIO, S.; PERAZZI, B.; MARTINEZ ORDOÑEZ, A.; RODRIGUEZ, CH.; BARBERIS, C.; VAY, C.; MOLLERACH, M.; FAMIGLIETTI, A.

Jornada; 157° Jornada Científica: Resistencia bacteriana y uso racional de los antibióticos; 2013

Academia Nacional De Farmacia y Bioquímica de la República Argentina

El objetivo de este trabajo fue conocer la frecuencia de aislamientos de S. aureus con sensibilidad intermedia a vancomicina (VISA) y aquellos con resistencia heterogénea (hVISA), evaluar diferentes metodologías para su detección y analizar las características genotípicas de los mismos.Se estudiaron todos los aislamientos de S. aureus provenientes de hemocultivos durante el período 1-08-2009 al 06-11-2010 en el Hospital de Clínicas José de San Martín. Inicialmente se analizó un aislamiento por paciente, pero en casos de bacteriemias múltiples se estudiaron además los aislamientos adicionales. En aquellos aislamientos SAMR se realizó la detección de los genes mecA y luk-PV,caracterización del SCCmec y genotipificación del locus agr mediante reacciones de PCR. Se determinó la CIM de vancomicina (VAN) y teicoplanina (TEI) por dilución en agar y Etest de VAN. Para la detección de hVISA se utilizaron las siguientes metodologías: MacroEtest de VAN, placas de screening de: BHI con 3, 4, 5 y 6µg/ml de VAN (BHIV3, BHIV4, BHIV5 y BHIV6), MHA con 5µg/ml de TEI(MHAT5), y la predifusión con tabletas de VAN y TEI. Se consideraron probables hVISA aquellos aislamientos que por al menos 2 de estos métodos dieron positivo (BHIV3, BHIV4, BHIV5, BHIV6 y MHAT5 desarrollo a las 48 h, MacroEtest VAN mayor a 4µg/ml, predifusión VAN mayor o igual a 22mm y /o TEI menor a 20mm). Posteriormente fueron confirmados mediante el método de análisis poblacional y área bajo la curva (PAP-AUC).Todos los aislamientos fueron sensibles a VAN (CIM menor o igual a 2µg/ml) por dilución en agar y Etest y a TEI (CIM menor o igual a 4µg/ml). Once de los 104 aislamientos de S. aureus resultaron probables hVISA y solo 3 fueron confirmados (PAP-AUC/PAP-AUC de Mu3 mayor o igual a 0.9), lo que representa el 3,3% de los pacientes con bacteriemias en el período de estudio Veintisiete aislamientos desarrollaron en al menos 1 placa de screening (19 en MHAT5, 15 EN BHIV3, 2 en BHIV4). La técnica de Macro Etest fue capaz de detectar a los 3 hVISA, mientras que el método de predifusión detectó 4 aislamientos de los cuales solo 2 fueron confirmados. Los 3 hVISA presentaron valores de CIM por Etest mayor a 1 µg/ml.No se encontraron aislamientos VISA y los hVISA fueron poco frecuentes y genéticamente no relacionados. Las placas de screening no resultaron de utilidad para la detección de hVISA, mientras que la combinación de E-test VAN mayor a 1µg/ml, macro E-test mayor o igual a 6µg/ml y predifusión VAN o TEI, alertaría frente a la presencia de un probable hVISA el cual requeriría una posterior confirmación.