Staphylococcus aureus con resistencia heterogenea a vancomicina (hVISA): aumento de la transposicion en un aislamiento seleccionado in vivo

DI GREGORIO, S.; PERAZZI, B.; FAMIGLIETTI, A.; MOLLERACH, M.

Rosario

Congreso; XIV Congreso de la Sociedad Argentina de Infectología; 2014

Sociedad Argentina de Infectología

PRESENTACION ORAL. Introducción: Previamente comunicamos un caso de infección osteoarticular asociado a  hVISA. Se recuperaron dos aislamientos: uno previo y otro posterior al tratamiento con vancomicina 30 mg/Kg/día durante 36 días (D1 y D2 respectivamente), cuyos valores de CIM a vancomicina fueron 0.5 y 1 μg/ml. Ambos fueron confirmados como hVISA por el método de análisis poblacional y área bajo la curva (PAP AUC). El mayor nivel de resistencia a vancomicina de D2 fue acompañado de una marcada disminución de la resistencia a oxacilina (CIM a oxacilina D1>128 μg/ml; D2=1 μg/ml).Objetivo:Caracterizar molecularmente los aislamientos hVISA. Materiales y Métodos: La detección de los genes mecA y luk S/F-PV, genotipificación del locus agr y la caracterización del SCCmec se realizaron mediante reacciones de PCR. La funcionalidad del locus agr fue evaluada por la actividad hemolítica de las cepas en agar sangre. La isogenicidad entre D1 y D2 fue estudiada por PFGE. Mediante Southern blot a partir del PFGE, se realizó la detección de IS256 y mecA con sondas específicas. Los aislamientos además fueron genotipificados por spa typing y MLST.Resultados: Mediante reacciones de PCR resultaron mecA positivos, luk S/F-PV negativos y agr tipo II. El tipo de SCCmec no pudo ser caracterizado utilizando las estrategias convencionales ya descritas, pero por mapeo con PCR fue detectado el Tn4001 downstream a los genes mecA-deltamecR1. Además fueron genotipificados por spa typing (t002) y MLST (ST100). Se demostró la funcionalidad del locus agr en agar sangre. Tanto el pulsotipo por PFGE como el perfil de hibridación correspondiente al gen mecA fueron idénticos en D1 y D2. Sin embargo, se vio un aumento en el número de copias de IS256 por Southern blot en el aislamiento recuperado posterior al fracaso terapéutico.Conclusiones: En este trabajo reportamos un aumento en el número de copias de IS256 asociadas con el fenotipo hVISA, indicando que la presión selectiva ejercida por los antibióticos durante períodos prolongados de tratamiento podría aumentar la frecuencia de transposición, y contribuir en última instancia con el desarrollo de resistencia a vancomicina.