Influencia de la Temperatura en la retención cromatográfica de compuestos ionizables

CECILIA B. CASTELLS; LEONARDO G. GAGLIARDI; CLARA RÀFOLS; MARTÍ ROSÉS; ELISABETH BOSCH

Huerta Grande, Córdoba

Congreso; II Congreso Argentino de Química Analítica; 2003

AAQA

La temperatura desempeña un rol escencial en el desarrollo de cualquier técnica cromatográfica. En el caso de cromatografía líquida de alta eficiencia (HPLC), un aumento en la temperatura de la columna produce un aumento en la difusividad del soluto en la fase móvil, un aumento de la solubilidad de los analitos, y una disminución de la viscosidad del eluyente, mejorando la cinética del proceso de partición y, en consecuencia, la forma de los picos y la eficiencia de la separación. Todos estos efectos han sido profundamente estudiados. Menos información existe sobre la influencia de la temperatura en la termodinámica del proceso retentivo en HPLC. De hecho, con las excepciones de cromatografía de exclusión molecular y de intercámbio iónico, son escasos los trabajos en donde la temperatura se controla como variable experimental. El reconocimiento de su importancia como una variable a tener presente para modificar la eficiencia, selectividad y tiempo de analisis es relativamente reciente. En el caso de solutos ionizables, su retención cromatográfica requiere del control del pH del eluyente. Así, el uso de la temperatura y el pH como variables para modificar la selectividad de compuestos ácidos o básicos requiere del conocimiento del efecto de la temperatura sobre el cambio de pH de la fase móvil hidrorgánica y sobre los pKa de analitos ionizables. En este trabajo nos hemos fijado dos metas. Priemro estudiar el efecto de la temperatura sobre las constantes de disociación ácida (pKa) de un grupo de ácidos y bases débiles en mezclas metanol/agua usadas comunmente como fases móviles  en cromatografía de líquidos en fase reveresa. Los compuestos elegidos son electrolitos usados comunmente para la preparación de tampones para regular el pH de las fases móviles. Hemos incuido también al estudio otros electrólitos débilespertenecientes a familias químicas diversas para verificar el diferente efecto de la temperatura sobre su pKa. La razón de este objetivo es obtener datos prácticamente inexistentes en bibliografía, que nos permitan predecir comportamientos cromatográficos de analitos ionizables en distintas condiciones experimentales. Segundo, realizar mediciones cromatográficas de retención de un importante número de soluts acídicos y básicos en dos medios tamponados, de igual pH pero regulados por bufferes de distinta naturaleza químca en mezclas metanol/agua y a distintas temperaturas. El efecto de un aumento de temperatura sobre la selectividad cromatográfica en ambos eluyentes es detalladamente discutido.  <!-- @page { size: 21.59cm 27.94cm; margin: 2cm } P { margin-bottom: 0cm; text-align: justify } P.western { font-size: 13pt; font-weight: bold } P.cjk { font-size: 13pt; font-weight: bold } -->