Análisis de la función del ácido salicílico en la respuesta hipersensible a PVX mediada por el gen Nb en Solanum tuberosum.

SÁNCHEZ, G.; BUSCHIAZZO, M.; SICILIANO, F.; MARANO, M.R-.

Buenos Aires

Congreso; VIII Congreso Argentino de Virología; 2005

Sociedad Argentina de Virología

El gen Nb confiere resistencia hipersensible a las cepas ROTH1 y CP2 del virus X de la papa (PVX). El elicitor viral de Nb es la proteína de movimiento de 25 kDa de PVX. La respuesta hipersensible (HR) se caracteriza por una rápida y localizada muerte de las células en el sitio de la infección y la activación de diferentes mecanismos de defensa. Entre otros, rápido flujo iónico, generación de especies reactivas del oxígeno (ROS), generación de óxido nítrico, activación de quinasas y MAP quinasas y la activación transcripcional de un amplio rango de ``genes de defensa´´. Los productos de estos genes pueden estar involucrados en la generación de moléculas intermediarias que actúan distal al sitio de la infección para establecer una respuesta sistémica adquirida (SAR). El rol del ácido salicílico (SA) en la HR y SAR ha sido bien establecido en los modelos experimentales Arabidopsis thaliana y Nicotiana tabacum, sin embargo poco se conoce acerca de su función en otras especies vegetales. El objetivo del presente trabajo es estudiar el rol del ácido salicílico en la respuesta de defensa mediada por el par Nb-PVX en Solanum tuberosum (papa). Se generaron líneas transgénicas del cv Pentland Ivory (genotipo Nb nb nb nb) que expresan el gen de la salicilato hidroxilasa (NahG), cuyo producto degrada el SA a catecol. Se cuantificaron por HPLC los niveles de SA libre y conjugado en las plantas transformadas, y en las no transformadas. Las hojas de papa NahG, deficientes en SA, mostraron ser más sensibles a los ROS generados tanto por estrés abiótico como por la infección viral, indicando que el ácido salicílico posee un efecto antioxidante en Solanum tuberosum. Además, desarrollamos un sistema para la expresión transitoria de la proteína de 25 kDa de las cepas ROTH1 y UK3 de PVX para estudiar la inducción de la respuesta de defensa mediada por Nb. Utilizando este sistema, en combinación con ensayos de infección viral analizamos bioquímica y molecularmente la respuesta de defensa en las plantas NahG. Los resultados obtenidos demuestran que el SA está involucrado en la resistencia mediada por Nb, sin embargo la función que cumple en Solanum tuberosum es notablemente diferente al rol informado en los modelos experimentales Arabidopsis y tabaco.