Diversidad genética de las vías de biosíntesis de isoprenoides y esteroles en Trypanosoma cruzi

COSENTINO RO; DIOSQUE P; AGÜERO F

Rosario

Congreso; XXVI Reunión Científica Anual; 2013

Sociedad Argentina de Protozoología y Enfermedades Parasitarias

Los esteroles como el colesterol son importantes componentes de las membranas celulares. A diferencia de las células de mamíferos, el esterol mayoritario en las membranas celulares de trypanosomátidos son el ergosterol y otros 24-metil esteroles, los cuales son necesarios para su crecimiento y viabilidad. A pesar de este requerimiento estricto, este grupo de organismos ha desarrollado diferentes estrategias para producir y/o obtener esteroles. Trypanosoma cruzi es el agente causal de la enfermedad de Chagas. En este parásito, uno de los pocos blancos validados para intervención quimioterápica es la vía de biosíntesis de esteroles y de sus precursores. En este trabajo presentamos un estudio de la diversidad genética observada en genes de la vía de biosíntesis de isoprenoides y esteroles en T. cruzi, y un análisis comparativo de la diversidad encontrada en otros trypanosomátidos. Usando varias estrategias bioinformáticas, primero completamos algunos huecos en las vías mediante la identificación de las secuencias de genes faltantes y/o truncados en la secuencia genómica del clon CL Brener. En base a este análisis identificamos un homólogo no ortólogo del gen ERG25 de levadura (esterol metil oxidasa) y proponemos que los ortólogos de ERG25 se perdieron en el ancestro de los trypanosomas (pero no de las Leishmanias). A continuación, para estudiar la diversidad genética, hemos amplificado y re-secuenciado 18 genes de estas vías metabólicas en un grupo de 16 cepas representativas de los seis linajes evolutivos mayoritarios de T. cruzi. Como resultado obtuvimos ~24Kpb e identificamos un total de 975 SNPs o diferencias fijas, de las cuales el 28% representan cambios no sinónimos. La mayoría de los genes se encuentran bajo una aparente selección purificadora. Sin embargo, luego de mapear estos cambios sobre información estructural disponible, hemos identificado un número de cambios que se encuentran en la vecindad (7 Å) de residuos clave, y que, por ende, podrían ser funcionalmente importantes. Un análisis comparativo de los genes correspondientes de T. brucei y Leishmania, obtenidos de los genomas disponibles, resalta el alto grado de conservación de esta vía, pero con diferencias en los genes que se encuentran en aparente selección purificadora en cada caso.