Nebulización de una formulación basada en anticuerpos específicos para su potencial aplicación en el control de la infección con virus Influenza H1N1. Caracterización aerodinámica y funcional

TAPIA C.; CESCHAN, N.E.; BARBIERI E.; PARRENO V.; ANDRES WIGDOROVITZ; RAMIREZ-RIGO M.V.; PUNTEL, MARIANA

Valle Hermoso, Cordoba

Congreso; XLIII reunion cientifica anual 2023; 2023

Sociedad Argentina de Virologia

control de la infección con virus Influenza H1N1. Caracterización aerodinámica y funcional.Tapia, C (1); Ceschan, N (2); Barbieri, E. (4); Parreño, V. (3); Wigdorovitz, A. (3); Ramírez-Rigo, M V (2); Puntel, M (1).(1)INIBIBB-UNS-CONICET; (2) PLAPIQUI-UNS-CONICET; (3) IncuINTA-CONICET; (4) CENPAT-CONICET.Las infecciones del tracto respiratorio inferior (LRTI) son una de las principales causas de morbilidad y mortalidad en todo el mundo, especialmente en niños pequeños y adultos mayores. El virus influenza es el responsable del 11,5% de los casos con mayor incidencia en los grupos mayores de 70 años. La inmunización pasiva utilizada en el tratamiento de infecciones respiratorias, es capaz de reducir significativamente la mortalidad y los requisitos de ventilación mecánica sin presentar efectos adversos graves en pacientes con infecciones virales respiratorias agudas. La administración local de anticuerpos específicos por inhalación, permite el acceso directo al tracto respiratorio reduciendo los efectos secundarios sistémicos a dosis menores. Nuestro grupo demostró el efecto profiláctico contra el virus influenza H1N1, ejercido por la inmunoterapia de anticuerpos específicos (plasma/ nanoanticuerpos) administrados por la vía intranasal en el modelo ratón. Anteriormente, demostramos que la técnica ELISA de hemaglutinina viral (HA) resultaba la apropiada para evaluar la estabilidad de los anticuerpos recuperados luego de la nebulización de plasma inmune por tecnología JET. En este trabajo, investigamos si la administración local, permite lograr una distribución homogénea de anticuerpos específicos en el tracto respiratorio, comparando el rendimiento de dos tecnologías de nebulización JET y MESH. En primer lugar, se analizó el comportamiento aerodinámico de una formulación de plasma inmune en buffer fosfato pH 7.4 (relación 1:3). Se realizaron nebulizaciones por triplicado para ambas tecnologías y mediante un sistema de impacto en cascada (NGI-Copley), se clasificaron las gotas de la dosis emitida según su diámetro aerodinámico. De especial interés resultaba la fracción fina de partículas (FFP) formada porn las gotas con diámetros menores a 5 µm, dado que éstas son las que componen la fracción inhalable capaz de alcanzar el tracto respiratorio inferior. Los valores de los parámetros aerodinámicos mostraron una correcta aerosolización y deposición de las partículas nebulizadas para ambas tecnologías (FFP 52.3 para JET vs 36.2 para MESH). Sin embargo, se observó un mayor porcentaje de recuperación proteica (3%) con la tecnología JET. El estudio de funcionalidad, analizado mediante un ELISA de HA, arrojó para ambas tecnologías, una detección efectiva de anticuerpos señalando la estabilidad del plasma luego de la nebulización. En conjunto, estos resultados indican, por un lado, que la formulación de plasma hiperinmune pudo ser nebulizada con alto rendimiento y que los anticuerpos conservaron la actividad específica. Y, por otro lado, que el uso de la tecnología JET alcanzó un mejor rendimiento con respecto a MESH, en cuanto a la cantidad de proteínas totales colectadas, sin perder la capacidad de reconocer el antígeno y con títulos de anticuerpos detectables.