Posible participación del calcio en el mecanismo de acción de la anandamida en la liberación de los espermatozoides del epitelio oviductal en bovinos

GERVASI MG ; OSYCKA SALUT C; LLADOS C; VILLALÓN M; PEREZ-MARTINEZ S

Mar del Plata, Buenos Aires

Congreso; LIV Reunión anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC) y LVII Reunión Ciéntifica Anual de la Sociedad Argentina de Inmunología (SAI); 2009

Previamente demostramos que tanto la anandamida (AEA) como su análogo estable (Met-AEA) promueven la liberación de los espermatozoides (ESP) de las células epiteliales del oviducto (CEO) mediante la activación de los receptores de cannabinoides CB1 y TRPV1. Asimismo demostramos que Met-AEA induce la capacitación espermática, siendo esta la posible causa de su liberación de las CEO. Dado que el aumento del calcio intracelular está asociado a la capacitación, estudiamos si la AEA induce este incremento en ESP bovinos en co-cultivo con CEO y si el calcio es necesario para la liberación de los ESP de las CEO.Se determinaron los niveles de calcio en ESP (cargados con FURA2-AM) en co-cultivo con CEO luego de la adición de agonistas cannabinoides. La medición se realizó mediante la adquisición de imágenes fluorescentes (F=340/380nm) seriadas. Los cambios en la fluorescencia, asociados a cambios en los niveles de calcio intracelular, se expresaron como área bajo la curva (ABC). La proporción de ESP que aumentó los niveles de calcio fue similar entre el control y los tratamientos (~30%). Sin embargo, en los ESP tratados con agonistas cannabinoides el ABC fue mayor al control (Control: 1,73±0,24; AEA: 3,76±0,86; Capsaicina: 5,5±0,58; p