EVALUACIÓN DE UN PROTOCOLO DE CRIOPRESERVACIÓN DE ESPERMATOZOIDES DE LLAMA EN AUSENCIA DE PLASMA SEMINAL

SCANDURA, MICAELA; APICHELA, SILVANA A.; ZAMPINI, RENATO

San Miguel de Tucumán

Jornada; XXII Jornadas Científicas y Encuentro de Jóvenes Investigadores "Augusto Palavecino"; 2021

Franja Morada, Facultad de Bioquímica, Química y Farmacia UNT

Introducción: Diferentes factores limitan el éxito de los protocolos de criopreservación espermática en Camélidos Sudamericanos (CSA). Los bajos porcentajes de preñez obtenidos por inseminación artificial (IA) con semen criopreservado podrían deberse a la elevada viscoelasticidad del plasma seminal (PS) que dificulta la homogenización del semen con los diluyentes e interferiría en la acción de los crioprotectores. Considerando que la mayoría de los protocolos de congelamiento en CSA no remueven el PS, la criopreservación en ausencia de PS podría ser una alternativa en estas especies. Objetivo: Evaluar un protocolo de criopreservación espermática en llamas empleando TCF-yema de huevo (TCF-EY) y glicerol (crioprotector), en ausencia de PS. Materiales y Métodos: Se obtuvo semen por electroeyaculación (n=5, r=4). Para remover el PS, los eyaculados se lavaron con HBS y se centrifugaron (800 xg, 8 min). El pellet espermático se suspendió en 100 µl de HBS y se diluyó en TCF-EY (120-160 x 10 6espermatozoides/ml). Se realizó el descenso de temperatura hasta 5 °C (2,5 hs), se diluyó 1:1 en TCF-EY suplementado con 12% de glicerol y se equilibró 20 min a 5 °C. Se envasó en pajuelas, se congeló en vapor de nitrógeno líquido (NL) a 5 cm del nivel del líquido por 15 min, se sumergió en NL y se almacenó 30 días. Se evaluó movilidad oscilatoria (MO), progresiva (MP) y total (MT=MO+MP); vigor y viabilidad espermática en: 1- semen fresco (SF), 2- espermatozoides lavados-suspendidos en HBS y 3- espermatozoides descongelados. Resultados: El SF presentó 64,6 ± 3,2% espermatozoides vivos y 42,0 ± 4,0% de MT, siendo mayormente MO (36.7 ± 4.1%). El vigor fue 2,9 ± 0,2. Luego de eliminar el PS la viabilidad se mantuvo en 64,5 ± 2,5%, la movilidad fue mayormente MO (24,7 ± 3,4%) y el vigor 3,4 ± 0,2. Luego de descongelar se observó una disminución(p menor a 0.05) de MT y MO (15,7 ± 2,4% y 6,2 ± 1,0% respectivamente), mientras que el vigor no se vio afectado en relación al SF. La viabilidad también descendió (39,8 ± 2.2%), no obstante, un importante porcentaje de espermatozoides se mantuvo viable con este protocolo. Conclusión: El congelamiento en ausencia de PS constituye una alternativa para la conservación de los espermatozoides en llama.