REGULACIÓN EPIGENÉTICA DEL MIR-203 DURANTE LA TRANSICIÓN EPITELIO-MESÉNQUIMA DE LAS CÉLULAS DE LA CRESTA NEURAL

SANCHEZ-VASQUEZ, E.; STROBL MAZZULLA, P.H.

Chascomús

Taller; III Taller de Biología Celular y del Desarrollo; 2016

Las células de la cresta neural (CCN) conforman un grupo de células multipotentes y presentes solo en etapas tempranas del desarrollo embriológico de vertebrados. Estas células se caracterizan por su capacidad migratoria, la cual es adquirida mediante un proceso conocido como transición epitelio-mesénquima (TEM), similar al que ocurre durante el inicio de la metástasis tumoral. En cáncer, se ha determinado que las regulaciones epigenética-microARN conforman un grupo de reguladores claves de la TEM. Considerando que las estrategias de desarrollo del cáncer son una reminiscencia de las estrategias usadas durante el desarrollo embrionario, es que nos propusimos estudiar este tipo de regulaciones durante la TEM de las CCN. Es así que, mediante análisis in silico encontramos que los genes PHD12 y Snail2, dos reguladores claves de la migración de las CCN, son blancos tentativos del mismo miR-203, el cual ha sido descripto como un supresor de tumores. Al analizar la expresión espacio-temporal de miR-203 en embriones de pollo mediante hibridación in situ con sondas LNA y stem-loop-RT-qPCR, se encontró que se expresa fuertemente en estadios pre-migratorios y disminuye al inicio de la TEM. Utilizando secuenciación por bisulfito, encontramos que la represión en la expresión de miR-203 estaría mediada por un aumento en la metilación de regiones genómicas regulatorias mediado por la metilasa de ADN DNMT3B. Mediante experimentos in vivo de ganancia y pérdida de función, pudimos observar que la sobreexpresión de miR-203 inhibe la migración de las CCN, mientras que el uso de un vector ?esponja? capaz de secuestrar los miR-203 endógenos promueve la migración prematura de las mismas. Considerando nuestros resultados en conjunto es que proponemos que la inhibición de la expresión de miR-203, mediada por la metilación en el ADN de regiones regulatorias, conduce a un aumento de sus genes blanco Snail2 y PHD12 para iniciar la TEM de las CCN. Tomados en conjunto, estos resultados tienen grandes implicancias para entender los errores que pueden conducir a un desarrollo anormal de las CCN, así como también podría tener implicancias de largo alcance en la comprensión de la metástasis tumoral