EVALUACIÓN DE LIPOPÉPTIDOS CÍCLICOS PRODUCIDOS POR CEPAS AUTÓCTONAS DEL GRUPO BACILLUS SUBTILIS COMO ESTRATEGIA DE BIOCONTROL CONTRA HONGOS FITOPATÓGENOS CAUSANTES DEL DAMPING OFF

PUCHE, R.; CORREA, A.; DIAZ, R.; BASSO, V.; PRINCIPE, A.; MEDEOT, D.B.; JOFRE, E.

Congreso; IV REUNIÓN CONJUNTA DE SOCIEDADES DE BIOLOGÍA DE LA REPÚBLICA ARGENTINA; 2020

El desarrollo de alternativas compatibles con el medio ambiente para mitigar el uso de agroquímicos en el control de fitopatógenos constituye uno de los principales desafíos ecológicos que enfrenta la humanidad. Entre estas alternativas cobra importancia la implementación de agentes de biocontrol en el marco de un manejo integrado de plagas. Tanto B. subtilis como B. amyloliquefaciens destinan un gran porcentaje de su genoma en producir compuestos de síntesis ribosomal como péptidos modificados y compuestos sintetizados por complejos enzimáticos como los policétidos, el dipéptido bacilisina y los lipopéptidos cíclicos (LPC). El objetivo general es contribuir al desarrollo e implementación de curasemillas biológicos a base de B. subtilis y B. amyloliquefaciens y/o sus metabolitos antimicrobianos para el biocontrol de fitopatógenos causantes del damping off, enfermedad que afecta muchos cultivos de importancia agrícola. Nuestro grupo de trabajo se ha enfocado en el estudio de los LPC producidos por cepas nativas de Bacillus aisladas por nuestro laboratorio e identificadas como B. amyloliquefaciens (A6, ARP23, MEP218) y B. subtilis (A7). En el presente trabajo se exploraron las capacidades de estas cepas para inhibir in vitro el crecimiento de los oomycetes y hongos causantes del damping off. Para ello se realizaron ensayos de antibiosis in vitro en placas incubadas a 23 °C durante 5-6 días hasta observar la presencia de halos de inhibición contra especies fitopatógenas Alternaria sp., Botrytis sp., Fusarium sp., Macrophomina sp., Phytophthora sp., Pythium sp., Rhizoctonia sp., Rhizopus sp., Sclerotinia sp. y Sclerotium sp.. Con el fin de evaluar la inhibición de los fitopatógenos por LPC, los mismos se purificaron a partir de cultivos de Bacillus en fase estacionaria y fueron utilizados en ensayos de antibiosis. Para caracterizar estos metabolitos se llevaron a cabo análisis de HPLC en fase reversa. En las principales fracciones activas recolectadas por RP-HPLC se identificó la presencia de tres familias conocidas de LPC (surfactinas, fengicinas e iturinas), presentes en las cuatro cepas de Bacillus. Los resultados obtenidos en los ensayos de antibiosis fueron variados dependiendo de la interacción bacteria-hongo, en general se observó que las cepas más efectivas para el biocontrol fueron A6 y A7 seguidas de ARP23 y MEP218. Los halos de inhibición formados por A6 y A7 fueron estables por 10 días, contrariamente el diámetro de los halos formados por ARP23 y MEP218 fueron disminuyendo con el pasar de los días. En cuanto a los ensayos de antibiosis con las fracciones de LPC se pudo evidenciar que la mayor capacidad antifúngica correspondió a las iturinas, seguida por las fengicinas y una poca o nula capacidad de inhibición de las surfactinas. De estos resultados se concluye que estas cepas bacterianas inhiben el crecimiento de los fitopatógenos causantes del damping off y que dicha inhibición es mediada por la producción de LPC, especialmente la fracción de las iturinas. Como perspectiva se propone identificar que fracción de las iturinas contribuye en mayor medida a la inhibición de los fitopatógenos mediante análisis de espectrometría de masas.