Cambios en la relación C:N inducen la producción de fengicinas con actividad antimicrobiana en Bacillus amyloliquefaciens MEP218

JOFRE, E.; MEDEOT, D.B.; ALVAREZ, F; LIAUDAT, J.P.

Pucón

Congreso; III Taller Latinoamericano de PGPR; 2016

En la actualidad uno de los principales desafíos ecológicos es el desarrollo de alternativas biotecnológicas compatibles con el medio ambiente para mitigar el uso de agroquímicos. Entre estas alternativas adquieren relevancia los biopesticidas que son organismos vivos y/o sus derivados naturales?como los lipopéptidos cíclicos (LPCs)?capaces de controlar las poblaciones de patógenos. Algunas especies de bacterias Gram-positivas del género Bacillus cumplen con todos los requerimientos para ser usados como biopesticidas ya que organismos como FDA y EPA han recomendado su utilización para el control biológico de fitopatógenos.En nuestro grupo se ha aislado e identificado una cepa nativa perteneciente al grupo Bacillus subtilis, denominada MEP218, la cual es capaz de inhibir in vitro e in vivo el desarrollo de diferentes especies de hongos fitopatógenos a través de la producción de LPCs. En este trabajo evaluamos la influencia de diferentes relaciones C:N utilizando como base el medio MOLP?óptimo para la producción de LPCs?que contiene sacarosa y NH4Cl como fuentes de carbono y nitrógeno en una relación C:N 10:1. Como fuentes alternativas de C y N se ensayaron glucosa, fructosa, NO3K y NH4NO3, cada una en relación C:N 10:1, 5:1 y 2:1. Se determinó la producción de biomasa mediante recuento en placa, la producción e identificación de LPCs en los sobrenadantes de cultivos, y la adhesión bacteriana a superficies hidrofóbicas. También se determinó la actividad antimicrobiana y la habilidad para desintegrar biofilms preformados de Xanthomonas spp. en la superficie de hojas.El máximo crecimiento y la mayor producción de LPCs se obtuvo en la condición glucosa:NH4NO3 10:1. Cuando se evaluó la actividad antimicrobiana de los LPCs mediante el método de difusión en discos contra cepas de Xanthomonas, en este medio se observó un notable incremento en la zona de inhibición en comparación con el MOLP. Además la adición de LPCs inhibió la adhesión de Xanthomonas tanto a superficies hidrofóbicas inertes como a la superficie de las hojas. Los LPCs fueron separados mediante HPLC y las fracciones con actividad antimicrobiana fueron identificadas mediante espectrometría de masas MALDI-TOF, resultando ser fengicina A C16 y C17, y fengicina B C17.