PEROXIDASA DE RABANO INMOVILIZADA EN FILMS DE UN POLICATION BIOINSPIRADO

ARAUJO, VIRGINIA M.; MARTINO, DÉBORA M.; PAZ ZANINI, VERÓNICA I.

Tucumán

Congreso; XXI Congreso Argentino de fisicoquímica y Química Inorgánica; 2019

Asociación Argentina de Investigación Fisicoquímica

Una de las etapas claves en el diseño y desarrollo de biosensores es la inmovilización del elemento de bioreconocimiento. En el caso particular de las enzimas, son deseables metodologías que posibiliten la conservación de su actividad y estabilidad. En este sentido, la formación de multicapas autoensambladas es una estrategia sencilla que posibilita generar nuevas propiedades químicas y/o electroquímicas sobre las superficies tratadas (1). El objetivo del presente trabajo es inmovilizar la enzima peroxidasa de rábano (HRP) sobre films de polielectrolitos obtenidos por copolimerización aleatoria en solución de monómeros derivados de 4-vinilbenciltimina (VBT) y 4-vinilbenciltrietilamonio (VBA), y evaluar la respuesta electroquímica frente a sustratos polifenólicos.ResultadosLos films se construyen, por interacción electrostática, sobre electrodos de pasta de carbono, cuyas superficies son previamente oxidadas a 1,4 V durante 100 s en una solución saturada de Na2CO3. La optimización de las condiciones experimentales (potencial de operación, pH del electrolito soporte, tiempo de adsorción de la enzima, entre otras) se lleva a cabo a través del estudio de la respuesta enzimática para la hidroquinona, con la ayuda de cronoamperometría y en presencia de H2O2. Los parámetros electroanalíticos se obtienen a partir de las curvas de calibración, derivadas de los respectivos experimentos de cronoamperometría.ConclusionesLos films de polielectrolitos obtenidos por copolimerización de monómeros derivados del VBT y VBA dan lugar a microentornos en los que la enzima retiene su actividad biológica y biocatalítica. Aún más, los parámetros analíticos obtenidos son destacados: sensibilidad de 0,050 μA μM-1, límite de detección de 11 nM y un rango de linealidad hasta 100 uM. Estos resultados demuestran el potencial de estas plataformas hacia el biosensado de compuestos polifenólicos.