Inmoviliazaci´on de lactato oxidasa en multicapas autoensambladas de nanopart´ıculas de oro y polidialil dimetil amonio

VERONICA I PAZ ZANINI; RODRIGO E. GIMÉNEZ; HORACIO MISHIMA; BEATRIZ A LÓPEZ DE MISHIMA

Córdoba

Encuentro; Nanocórdoba 2014; 2014

Universidad Nacional de Córdoba

La síntesis y caracterización de nanomateriales y nanoestructuras es un Area de creciente interés, debido que ofrecen la posibilidad de generar sistemas con propiedades únicas, a través del control de la forma, el tamaño y el grado de espaciamiento en los nanosistemas. Las partículas de oro coloidal (AuNPs) son muy interesantes para el diseño de biosensores electroquimicos, debido a sus propiedades ópticas, eléctricas [1] y bio-compatibles [2]. La síntesis de los coloides involucra la reducci´on de una sal de Au en presencia de agentes estabilizantes (tioles, citratos, etc.) cuyos grupos funcionales aportan propiedades específicas [3]. Por su parte, las películas formadas por multicapas autoensambladas son estrategias muy utilizadas para la inmovilización de enzimas, por las posibilidades que ofrecen en cuanto a control espacial de la distribución de biomoléculas, respuesta a interferentes, etc. En particular, la Lactato Oxidasa (LOx) ca taliza la conversi´on de lactato a piruvato con consumo de O2 y producción de H2O2 y ha sido ampliamente utilizada en biosensores de lactato. El objetivo del presente trabajo es la inmovilizaci´on de LOx en sistemas autoensamblados con nanopart´ıculas de oro y pol´ımeros catiónicos, y la caracterización analítica de los bioelectrodos desarrollados. La formación de las multicapas se llevó a cabo mediante inmersiones alternadas en soluciones de enzima, nanopartículas de oro y el polímero catiónico polidialildimetil amonio (PDDA). Como electrodo de trabajo se emplearon discos de Au pulidos a espejo, activados electroquímicamente, recubiertos con ácido 3-mercapto propan sulf´onico.Se establecieron las mejores condiciones de inmovilización y se analizó el comportamiento electroquímico del ferrocén metanol (mediador artificial) por voltametría cíclica y cronoamperometría; la señal analítica está dada por la corriente estacionaria cronoamperométrica medida al potencial de oxidaci´on del mediador, para diferentes concentraciones de sustrato. Se determinaron los parámetros analíticos de los electrodos para la cuantificación de lactato, los cuales resultaron sumamente satisfactorios y comparables con los que se encuentran informados en bibliografía [4,5] para sistemas similares, . 1. M. I. Prodomidis, M. I. Karayannis. Electroanalysis 14 (2002) 241-261. 2. F. Scheller, F. Schubert, Techniques and Instrumentation in Analytical Chemistry: Biosensors, Vol. 11, Elsevier, Ansterdam, London, New York, Tokio, 1992. 3. H.Cai, C. Xu, P.He, Y.Fang, J. Electroanal.Chem. 510 (2001) 78-85. 4. A. Parra, E. Casero, L. V´azquez, F. Pariente, E. Lorenzo, Anal. Chim. Acta, 555 (2006) 308-315. 5. M. Gamero, F. Pariente, E. Lorenzo, C. Alonso, Biosens. Bioelectron, 25 (2010) 2098-2044.