COINFECCIÓN TRYPANOSOMA CRUZI-HIV EN ASTROCITOS. IMPACTO EN LA APOPTOSIS Y LA REPLICACIÓN VIRAL

JAVIER URQUIZA; JUAN M. BURGOS; DIEGO OJEDA; CARLA PASCUALE; MARÍA SUSANA LEGUIZAMÓN; JORGE QUARLERI

Congreso; XII Congreso Argentino de Virologia; 2017

Trypanosoma cruzi (Tc) es el agente etiológico de la enfermedad de Chagas que en individuos inmunocomprometidos coinfectados por el virus de inmunodeficiencia humana (HIV) puede comprometer seriamente el sistema nervioso central (SNC). Se reportó que los astrocitos -células más abundantes del SNC- son permisivas de infección separadamente por cada uno. Como objetivos, se pretende (a) esclarecer si ambos pueden cohabitar intracelularmente, (b) analizar el impacto en la apoptosis celular, y (c) estudiar el impacto en la multiplicación recíproca. Para ello, astrocitos humanos en cultivos convencionales y en transwell fueron infectados con ambos patógenos siguiendo esquemas definidos. A fines de lograr mayores niveles de infección por HIV y realizar evaluaciones cuantitativas de las eficiencias de infección por cada uno, se construyeron pseudovirus del HIV expresando la glicoproteína G del VSV y se modificaron genéticamente tanto HIV como Tc para que expresen fluoróforos (GFP, DsRed), respectivamente. Empleando ensayos de ELISA, microscopia de fluorescencia y citometría de flujo se evaluaron (I) nivel de apoptosis celular (anexina V, caspasas 3/7), (ii) eficiencia de infección por HIV y Tc, (iii) infectividad de la progenie viral (en células GHOST), (iv) niveles de citoquinas celulares del perfil Th1/Th2/Th17 y, (v) acción del exoantígeno parasitario transialidasa (formas activa e inactiva). El análisis de los resultados incluye comparaciones estadísticas empleando la prueba t de Student, con significación p p