StarD7 se comporta como una proteína fusogénica de bicapas de fosfolípidos.

SANCHEZ, JM, ANGELETTI, SOFIA, GENTI RAIMONDI, S Y PERILLO, MA.

La Plata. Bs As

Otro; XXXVII Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Biofísica; 2008

StarD7 se relaciona estructuralmente con una superfamilia de proteínas con un dominio (Star) asociado a la transferencia de lípidos. Por sí misma, forma filmes de Langmuir y se incorpora preferencialmente a interfaces de lípidos cargados negativamente (Angeletti et al., BBRC, 2004 314 181). En este trabajo se estudió la interacción de StarD7 con liposomas, tendientes a discriminar entre fusión o transferencia de lípidos como posibles mecanismos de acción de esta proteína. El fluoróforo BODIPY-PC se incorporó, en una relación molar 1:3, a liposomas unilamelares pequeños (SUVs) de DMPC:DMPS (80:20). Se registró la intensidad de fluorescencia (IF) de BODIPY-PC en SUVs vs. tiempo (lex490nm, lem515nm) y se analizaron los datos teniendo en cuenta dos etapas sucesivas iniciadas con: el agregado de StarD7 o buffer (Etapa I) y de LUVs (Etapa II), en cada etapa se alcanzó un plateau en la IF. Se observó que: a) En ambas etapas la presencia de StarD7 indujo un aumento, concentración-dependiente, de IF con respecto a la muestra control sin proteína. b) A pH=6 (pI de StarD7) el aumento de IF en la Etapa I fue menor que a pH de 7,8. c) Experimentos de dispersión cuasi-elástica de la luz mostraron un aumento del 40 % en el diámetro de SUVs desde 33 a 48nm y una nueva población de mayor tamaño (175-326nm) inducidos tanto por  LUVs como por StarD7. d) SUVs de PE:PS indujeron un aumento en IFBODIPY-PC similar al inducido por StarD7. e) A diferencia de b-Gal y Pepsina que fueron inactivas, el efecto de BSA fue similar al de StarD7. f) Tanto StarD7 como LUVs indujeron un aumento en la IFBODIPY-PC a lem515 (lex=340) en presencia de SUVs conteniendo BODIPY-Cer (lex,max = 340). Tomados en conjunto nuestros resultados sugieren que: 1- StarD7 induce fusión de vesículas (c,d), lo cual explicaría el aumento en la IFBODIPY-PC (a-f) como una consecuencia de la dilución interfasial de la sonda que lleva a la desaparición de un autoapagamiento inicial de la fluorescencia. 2- La interacción StarD7- SUVs es inespecífica (a,d, e) y de naturaleza electrostática (b) Financiado por CONICET, SeCyT-UNC, ACC y Foncyt.