LIGNOSUBERIZACION DE RAICES TRANSFORMADAS Y SU RELACION CON UNA PEROXIDASA LIBERADA AL MEDIO DE CULTIVO POR TRATAMIENTO SALINO

TALANO M, REYNOSO H, TORDABLE MC, MEDINA MI, AGOSTINI E, TIGIER H, MILRAD S.

Santa Rosa-La Pampa

Congreso; XXV Reunión de Fisiología Vegetal; 2004

Sociedad Argentina de Fisiología Vegetal

Los cultivos de raíces transformadas de tomate (Lycopersicon esculentum cv. Pera) muestran liberación al medio de cultivo de una isoenzima de peroxidasa básica en respuesta a tratamientos con 100 mM NaCl agregados al medio líquido de Murashige Skoog (MS) (Talano et al., 2003). Esta isoenzima iónicamente unida a pared posee alta eficiencia catalítica frente a alcohol coniferílico (AC), sustrato marcador de peroxidasas involucradas en lignosube-rización, incluso mayor a la de una peroxidasa aislada de raíces de tomate del mismo cv. que se induce en respuesta a 100 mM NaCl y que participa del proceso de lignosuberización (Quiroga et al., 2000; Lucena et al., 2003). Los objetivos de este trabajo fueron: Comprobar si la liberación de esta isoenzima es una respuesta al estrés salino o es debida al efecto de la fuerza iónica del MS/NaCl en medio líquido. Analizar el contenido de lignina y suberina en los tejidos de las raíces control y tratadas crecidas en medio líquido y medio semisólido y Correlacionar la presencia de esta enzima con el grado de lignificación y/o suberización de los tejidos. Experimentalmente demostramos que paredes aisladas tratadas con MS/50 mM NaCl durante 20 min mostraron la liberación de esta isoenzima básica dada la alta fuerza iónica de la solución. Para los análisis histoquímicos se utilizaron cortes transversales de raíces, previamente desparafinados y tratados con fluoroglucinol-HCl. Las observaciones se realizaron con campo claro y fluorescencia. Las raíces control crecidas en MS líquido, manifestaron intensa fluorescencia en las paredes tangenciales externas de la exodermis dada por la presencia de lignina y suberina; marcada fluorescencia en paredes radiales de la endodermis debida a la presencia de suberina y escasa fluorescencia en las paredes de los elementos conductores de xilema señalando la baja deposición de lignina en las mismas. En las raíces tratadas fue tenue la fluorescencia de la exodermis y de la endodermis y muy notable la de los elementos xilemáticos. En medio MS semi-sólido, algunas raíces crecieron inmersas en el mismo, mientras que otras no tomaron contacto directo con el medio. Estas últimas raíces, fueron las seleccionadas para analizar. En este caso tanto las raíces controles como tratadas, manifestaron una intensidad de fluorescencia similar en las paredes radiales de las células endodérmicas. Sin embargo las raíces control mostraron una menor fluorescencia que las tratadas a nivel de la exodermis y de los elementos xilemáticos, en especial del metaxilema, los que aún se encontraban en proceso de diferenciación. Estos resultados indican que el tratamiento salino estimuló la lignificación en las paredes de los elementos conductores de xilema independientemente del medio de cultivo utilizado, además sugieren que la liberación de la peroxidasa básica observada en el medio líquido podría ser en parte responsable del menor grado de lignosuberización de la exodermis, observado en las raíces tratadas crecidas en este medio. Las propiedades cinéticas de esta peroxidasa y los cambios en el contenido de lignina-suberina observados confirmarían in situ la participación de esta enzima en el proceso de lignosuberización de las paredes celulares, al menos de la exodermis.   Agradecimientos a CONICET, SeCyT UNRC y FONCYT-Agencia Córdoba Ciencia.