INVESTIGADORES
FOSSATI Carlos Alberto
congresos y reuniones científicas
Título:
Clonado y expresión de alergenos de soja recombinantes. identificación de peptidos inmunodominantes de reactividad cruzada entre proteínas de leche bovina y soja
Autor/es:
CURCIARELLO R,; CANDREVA ANGELA; GONZALEZ V; SMALDINI P; FOSSATI, CA; PARISI G; PETRUCCELLI S,; DOCENA GH,
Lugar:
Mar del Plata
Reunión:
Congreso; LVII Reunión Científica de la Sociedad Argentina de Inmunología y LIV Reunión Científica de la SAIC; 2008
Institución organizadora:
SAI y SAIC
Resumen:
<!-- /* Style Definitions */ p.MsoNormal, li.MsoNormal, div.MsoNormal {mso-style-parent:""; margin:0cm; margin-bottom:.0001pt; mso-pagination:widow-orphan; font-size:12.0pt; font-family:"Times New Roman"; mso-fareast-font-family:"Times New Roman";} @page Section1 {size:595.3pt 841.9pt; margin:2.0cm 62.35pt 2.0cm 70.9pt; mso-header-margin:35.45pt; mso-footer-margin:35.45pt; mso-paper-source:0;} div.Section1 {page:Section1;} -->
349 (759) APOPTOSIS AUMENTADA POR TRATAMIENTO
CON GLOBOTRIAOSILCERAMIDA (GB3) SOBRE CÉLULAS
MONONUCLEARES DE SANGRE PERIFÉRICA.
IMPLICANCIAS PARA LA ENFERMEDAD DE FABRY. De
Francesco P.1; Fossati C.2; Rozenfeld P.3
LISIN, Facultad de Ciencias Exactas, UNLP1 2 3
<nicolasdefrancesco@gmail.com>
La globotriaosilceramida (Gb3) es un glicolípido neutro que se
acumula en la Enfermedad de Fabry (EF), una enfermedad de
almacenamiento lisosomal causada por la deficiencia genética Xligada
de la enzima lisosomal a-galactosidasa A. Los valores
plasmáticos de Gb3 en pacientes con EF se hallan en el rango
de 2 a 50 ìM, mientras que en individuos sanos son menores a
1,2 µM. Resultados preliminares de nuestro grupo indicarían la
existencia de un estado proapoptótico en células mononucleares
de sangre periférica (PBMC) de pacientes con EF. En el presente
trabajo se investiga los efectos del tratamiento con Gb3 sobre
los niveles de apoptosis de PBMC normales. Partiendo de sangre
periférica de sujetos normales, se aislaron PBMC mediante
un gradiente de ficoll, y se cultivaron en presencia de Gb3 variando
el rango de concentraciones de 0 a 40 µM, por 48 hs, y a una
concentración fija de 20 µM por diferentes tiempos, hasta 48 hs.
Posteriormente se procedió a analizar los niveles de apoptosis de
estas células mediante las técnicas de Anexina-V y TUNEL por
citometría de flujo. También se determinó el grado de despolarización
de la membrana mitocondrial (DMM) mediante JC-1. En
la cinética del tratamiento con Gb3 se observó un aumento en los
niveles de apoptosis en linfocitos y monocitos, alcanzando los
valores máximos a las 6 hs para Anexina-V y 48 hs para TUNEL.
Así mismo, el agregado de Gb3 produjo una DMM que fue máxima
a las 6 hs. Los experimentos de dosis-respuesta con Gb3
mostraron una dependencia de los niveles de DMM y apoptosis
en linfocitos y monocitos al aumentar la dosis. Estos hallazgos
muestran un efecto directo de dosis patológicamente elevadas de
Gb3 sobre la fisiología de las PBMC, lo que podría sugerir un vínculo
causal con la apoptosis observada en PBMC de pacientes.
La observación de la disrupción del potencial mitocondrial mediante
JC-1 indicaría la activación de la vía intrínseca de apoptosis
como mediadora de este proceso.
