Efecto del ligando axial en la estructura electrónica del sitio de CuA: Estudio espectroscópico de mutantes del residuo Met160

LEDESMA, G. N.; ABRIATA, L. A.; VILA, A. J.

Carlos Paz, Córdoba, Argentina

Congreso; XXXIV Reunion Anual de la Sociedad Argentina de Biofísica; 2005

Sociedad Argentina de Biofísica

Las citocromo c oxidasas son enzimas de membrana que catalizan la reducción de O2 a H2O, con el aporte de cuatro electrones provenientes de cuatro moléculas de citrocromo c. La puerta de entrada para los electrones en las citocromo c oxidasas es CuA, un sitio de cobre binuclear, que transfiere electrones desde el citocromo c hacia el centro redox con alta eficiencia y a través de distancias del orden de ~20Å.1 El sitio CuA está constituido por un núcleo Cu2S2, donde cada ion cobre está fuertemente coordinado a dos átomos de S de dos residuos de Cys que actúan como puente entre los dos iones metálicos, y a un residuo de His a través de sus átomos de Nd. Además, uno de los iones Cu está coordinado débilmente al residuo Met160 a través de su Se y el restante ion Cu al carbonilo peptídico del residuo Glu151.2 Estudios recientes mostraron que la introducción de una mutación puntual en el ligando axial Met160 induce modificaciones electrónicas únicamente en los ligandos unidos a Cu1.3 Esta observación confirma la robustez del sitio de CuA, una propiedad crucial para minimizar la energía de reorganización, permitiendo a su vez una variación en el potencial de reducción del centro. El presente trabajo tiene por objetivo realizar un estudio sistemático de las perturbaciones sobre el sitio de CuA, ocasionadas por la modificación del ligando axial. Para ello, se estudiaron una serie de mutantes puntuales de Met160 conteniendo residuos hidrófobos, cargados y polares y se registraron espectros electrónicos de absorción UV-vis y de Resonancia Magnética Nuclear paramagnética. Referencias: 1.      Wuttke, D.S. et al. Science 1992, 256, 1007. 2.      Williams, P.A. et al. Nat. Struct. Biol. 1999, 6, 509. 3.      Fernández, C.O. et al. J. Am. Chem. Soc. 2001, 123, 11678.