Extracción y cuantificación de ésteres metílicos de ácidos grasos a partir de microalgas

PALERMO, J.; SANCHEZ, M.; SILESS, G.; PATIÑO CANO, L.

2010-01-01

2010-12-12

Química

Energia-Bioenergia

1) Extracción de aceite a partir de microalgas -         Se utilizará material vegetal seco provisto por los solicitantes. -         Se realizarán extracciones mediante dos técnicas diferentes: a) Extracción a temperatura ambiente por maceración con agitación. - A partir de 100 g de alga seca se realizó la extracción con 300 ml de solvente. A un tiempo determinado se procedió a filtrar el extracto para recuperar el material vegetal residual. - Se realizaron 3 experimentos en paralelo con tiempos de extracción de 24, 48 y 72 horas. (muestras 1, 2 y 3). Sobre cada una de estas muestras se realizaron 2 extracciones con hexano (P.A) y una tercera con cloruro de metileno/metanol (3:1). La primera extracción con hexano fue codificada con la letra a, la segunda con hexano con la letra b, y la extracción final (CH2Cl2/MeOH 3:1) con la letra c. De esta forma se obtuvieron 9 extractos que fueron llevados a sequedad en Rotavap, terminados de secar en bomba de vacío y posteriormente pesados. - Con el residuo de material vegetal de las primeras extracciones, se procederá a realizar una segunda extracción en frío con hexano mediante la técnica descrita, para así obtener los extactos SEF (segundo extracto en frío): SEF1 (24 hs), SEF2 (48 hs.) y SEF3 (72 hs.). - Con el residuo de material vegetal de las segundas extracciones se procederá a realizar una extracción final de lípidos a temperatura ambiente utilizando como solvente 300 ml. de CH2Cl2/MeOH (3:1). De esta forma se obtendrán los extractos TEF (tercr extracción en frío): TEF1 (24 hs), TEF2 (48 hs.) y TEF3 (72 hs.). b) Extracción contínua mediante equipo Soxhlet: -   A partir de 35 g de alga seca (muestra 5) se realizó la extracción en equipo Soxhlet con 150 ml. de hexano (P.A.) durante 8 horas (extracto 5a). -   El residuo vegetal de la primera extracción con Soxhlet fue sometido a una segunda extracción contínua con 300 ml. de MeOH (P.A.) como solvente. . El extracto metanólico será evaporado en Rotavap para de esta forma se obtener el extracto SES (segundo extracto Soxhlet). 2) Cuantificación: -         Todos los extractos así obtenidos (PEF1, PEF2, PEF3, SEF1, SEF2, SEF3, TEF1, TEF2, TEF3, PES y SES serán pesados para determinar el rendimiento en aceite crudo. -         Cada uno de los extractos (0.5 g) será saponificado y metilado (NaOH, MeOH) para estudiar por RMN1H cuantitativo el rendimiento en ésteres metílicos y la posible presencia de ácidos grasos poli-insaturados. Para el estudio por RMN se partirá de 100 mg de ésteres metílicos, se agregarán 100 mg de un Standard apropiado y se disolverá en 2 ml de CDCl3.