EVALUACION DE UNA ESTRATEGIA VACUNAL NASAL CONTRA T. cruzi: RESPUESTA HUMORAL SISTEMICA Y EN GLANDULA SALIVAL

CABRAL, NICOLÁS; PACINI, MARIA F.; GONZÁLEZ, FLORENCIA1; VILLAR, SILVINA ; FARRÉ, MARIA C.; CHAPO, GUSTAVO; MARCIPAR, IVÁN; MAGNI, CHRISTIAN; PÉREZ, ANA R..

Rosario

Congreso; XX y XXXVIII reunión Anual de la Sociedad de Biología de Rosario; 2018

Una estrategiaen el desarrollo de vacunas contra patógenos que ingresan por vía oro-faríngeaes realizar una inmunización vía nasal para generar respuesta sistémica y local(sitios inductores y efectores). Las glándulas salivales (GS) son sitiosefectores del tejido linfoide asociado a la mucosa nasal y gástrica. A estasglándulas arriban linfocitos previamente estimulados en los sitios inductoresde la mucosa, lo que permite que las GS secreten anticuerposantígeno-específicos en la saliva. Por otra parte, las formas de transmisiónmás comunes de T. cruzi (agente causal de la Enfermedad de Chagas) sonla vectorial y la congénita; sin embargo, la infección por vía oral es cada vezmás frecuentes en distintos países de la región. Dado que actualmente noexisten vacunas para el control del T. cruzi, nos propusimos evaluar sila administración nasal de una formulación vacunal que contiene un antígenorecombinante del parásito denominado transialidasa (TS) y emulsionado enadyuvantes (c-di-AMP o ISPA), generaba una respuesta inmune protectora. Paraello, ratones BALB/c hembras fueron inoculados por vía nasal con las siguientesformulaciones (20 μl/dosis en 3 dosis, 1 cada 15 días): PBS (G1), TS+di-c-AMP(G2), TS+ISPA (G3) y TS (G4). Quince días luego de la última inmunización, losanimales (n=5/grupo), se infectaron en la mucosa oral con 2500 T. cruzi cepaTulahuén. Adicionalmente, a un grupo de 5 animales no se los inmunizó niinfectó (NI-NI). A los 28 días post-infección, se obtuvo plasma para evaluar laproducción sistémica de anticuerpos específicos para TS (por ELISA), mientras anivel de la GS se evaluó ?in situ? el grado de respuesta inflamatoriamediante evaluación histopatológica (tinción con hematoxilina y eosina). Losgrupos G2 y G3 presentaron mayores niveles plasmáticos de IgG2a específica ymenor número de parásitos circulantes que los grupos G1 y G4 (p<0,05 enambos casos, Kruskall Wallis test). En las glándulas salivales, se cuantificó elárea de infiltrado inflamatorio y el posible daño generado sobre el parénquima,mediante la evaluación de imágenes microscópicas obtenidas por fotografía encampos 20X (Sofware Image J). El score se determinó como la suma de puntajesindividuales de cada grupo/número de cortes evaluados (1=Leve; 2=moderado, 3Severo). Los grupos inmunizados presentaron mayor cantidad y severidad deinfiltrado inflamatorio mononuclear/linfocitario que el grupo G1, siendo mássignificativo en el G2 (Score: G2=1.75; G1=1; p<0,05). La GS del grupo NI-NIpresentó características normales. Los animales infectados con T. cruzi ypreviamente inmunizados por vía nasal con TS en presencia de adyuvantes (G2 yG3) presentaron una mejor respuesta humoral sistémica en comparación a los quefueron inmunizados solamente con el antígeno. A nivel de la GS, la llegada deleucocitos fue más evidente en los grupos inmunizados, lo cual sugiere unamejor respuesta efectora ?in situ?. Estos resultados indican que lainmunización nasal es una vía promisoria de administración de formulacionesvacunales tendientes a generar una respuesta anti-T. cruzi protectorasistémica y local.