Estudio del receptor TNF-R1 en la inflamación hepática en un modelo animal de dieta rica en grasa (High Fat Diet, HFD).

SEDLMEIER, MARÍA G; LAMBERTUCCI, FLAVIA; ARBOATTI, AINELÉN; ROGGERO, EDUARDO; CARNOVALE, CRISTINA E; RONCO, MARÍA T; VILLAR, SILVINA R Y FRANCES, DANIEL E

Rosario

Congreso; XVIII Congreso y XXXVI Reunión Anual de la SBR 2016.; 2016

ESTUDIO DEL RECEPTOR TNF-R1 EN LAINFLAMACIÓN HEPÁTICA EN UN MODELO ANIMAL DE DIETA RICA EN GRASA (HIGH FAT DIET,HFD)Sedlmeier, María G1; Lambertucci, Flavia1; Arboatti, Ainelén1; Roggero, Eduardo2; Carnovale, Cristina E1; Ronco, María T1; Villar, Silvina R2 y Frances, Daniel E11Instituto de Fisiología Experimental(IFISE-CONICET) ; 2 Instituto de Inmunología Clínica y Experimental deRosario (IDICER-CONICET-UNR). frances@ifise-conicet.gov.arLa obesidad es una enfermedad inflamatoria crónica,estrechamente asociada con trastornos metabólicos como la diabetes, lasenfermedades coronarias y la enfermedad del hígado graso. A nivel hepático, la obesidad conduce a unaumento en los depósitos de lípidos y a un estado inflamatorio caracterizado enparte, por un incremento de la producción de citocinas tales como el TNF-a, interleuquinas (IL) 1b e IL-6; y en parte a la activación decélulas no parenquimales (NPCs), fundamentalmente macrófagos hepáticosresidentes (células de Kupffer) y a un aumento del número de macrófagosreclutados. Los macrófagos son una de las poblaciones celulares máspleiotrópicas del sistema inmune. Luego de su activación, pueden serclasificados fenotípica y funcionalmente como M1, los cuales son inducidos porIFN-γ y/o TNF-α hacia un perfilproinflamatorio que favorece el sesgo de los linfocitos colaboradores a TH1, mientras que los macrófagosactivados alternativamente a M2 exhibenun fenotipo que favorece la diferenciación de los linfocitos colaboradoreshacia un perfil TH2 y estáninvolucrados en la resolución de la inflamación y la reparación del tejido.Resultados previos demuestran que ratones alimentados con una HFD presentanelevados niveles de glicemia e insulino resistencia. Por lo expuesto, el objetivo del presente trabajo fue evaluar elrol del receptor de TNF-a R1 (TNFR1) en el proceso inflamatorio hepático desencadenado porun modelo de obesidad inducido por una dieta rica en grasa. Para ello se utilizaron ratones C57BL/6 Wild Type (Wt) yratones knock out en TNFR1 (KOR1) que fueron alimentados con dieta estándar(CHOW-Wt, CHOW-KOR1) o con dieta rica en grasa (40%) durante 16 semanas(HFD-WT, HFD-KOR1). Se evaluó el establecimiento del modelo mediante elseguimiento de la ganancia de peso corporal y los valores plasmáticos deglucosa, triglicéridos, colesterol, insulina y la función hepática por medio delos niveles de GOT y GPT. En cortes histológicos hepáticos teñidos conhematoxilina y eosina, se evaluó el grado de infiltrado inflamatorio,confirmándose la existencia de inflamaciónlobular moderada a severa sólo en ratones HFD-KOR1. Mediante perfusión delhígado con colagenasa y centrifugación diferencial se aislaron las NPCshepáticas y se analizaron por citometría de flujo, encontrándose un porcentajemayor en el contenido de macrófagos (células F4/80+) en los ratones HFD-KOR1 comparado con losHFD-Wt (HFD-WT: 2,9 % y HFD-KOR1: 11,5 %; p<0,05). Asimismo, se analizó porwestern blot en las NPCs aisladas de la expresión proteica de iNOS y COX-2(marcadores de polaridad de macrófagos, indicando un perfil pro-inflamatorioM1). Los resultados mostraron que las NPCs aisladas de los grupos en HFD teníanun aumento en la expresión proteica tanto de iNOS (HFD-Wt: 155±20; HFD-KOR1: 311±64# (porcentaje, siendo CHOW-Wtel 100%)) como de COX-2 (HFD-Wt: 141±26; HFD-KOR1: 361±9# (porcentaje, siendo CHOW-Wt el 100%))(#p<0,05 vs HFD-Wt). Nuestros resultados sugieren que en nuestro modelo dietario de obesidad, la deficiencia en laseñalización dependiente del receptor TNFR1 no sólo conduce a un aumento en elnúmero de células F4/80+ en el hígado,sino que además dichas células muestran un perfil preponderantementepro-inflamatorio, siendo el TNF-a uno de los factores involucrados enla respuesta inflamatoria.