REGULACIÓN POST-TRADUCCIONAL DEPENDIENTE DE AMPc DE LA MAP QUINASA FOSFATASA-1 (MKP-1) EN CÉLULAS DE LEYDIG

L. BRION; P. MALOBERTI; G. SUÁREZ; A. GOROSTIZAGA; F. CORNEJO MACIEL; EJ PODESTÁ; C. PAZ

Mar del Plata, Buenos Aires

Congreso; LII Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2007

Sociedad Argentina de Investigación Clínica

En células adrenocorticales y de Leydig el control hormonal de la esteroidogénesis y de la proliferación celular ocurre mediante un mecanismo que incluye la actividad de PKA y de MAP quinasas, particularmente ERK1/2. Previamente demostramos que en este tipo de células la MAP quinasa fosfatasa 1 (MKP-1), una enzima que desfosforila específicamente a los miembros de la familia de las MAP quinasas, se induce a nivel transcripcional por un mecanismo dependiente de PKA. Con el fin de conocer si la regulación de MKP-1 en células de Leydig de la línea MA-10 incluye también mecanismos post-traduccionales, se emplearon células transfectadas transitoriamente con el ADNc correspondiente a MKP-1 para expresar constitutivamente esta proteína y células transfectadas con el vector vacío como control. Mediante Western blot observamos que en las células que sobre-expresan MKP-1, la incubación con 8Br-AMPc (0,75 mM, 0-180 min) incrementa los niveles de esta proteína en una magnitud muy superior (20-30 veces) a la registrada en las células transfectadas con el plásmido vacío (expresión endógena). El efecto del AMPc sobre MKP-1 se reduce por inhibición de la activación de ERK (PD98059). La incubación de las células que sobre-expresan MKP-1 con un inhibidor del proteosoma (MG132) aumenta la actividad de fosfatasas determinada usando [32P]-poli-Glutámico-Tirosina como sustrato (Control = 515 ± 50, MG = 933 ± 82 cpm/min/µg proteína, P