INVESTIGADORES
PERERA Maria Francisca
informe técnico
Título:
Informe de validación de uso de nucleótidos fluorescentes diferentes
Autor/es:
OVJERO, N; PERERA, M. F.
Fecha inicio/fin:
2023-08-01/2023-08-14
Naturaleza de la
Producción Tecnológica:
Biológica
Campo de Aplicación:
Produccion vegetal-Otros
Descripción:
OBJETIVO Y ALCANCE DEL MÉTODOComparar los perfiles de amplificación de marcadores moleculares TRAP obtenidos con el uso de dos nucleótidos fluorescentes diferentes.El Cy5.5.dCTP (Cytiva, número de catálogo: PA55521) es un nucleótido unido a un colorante fluorescente brillante que es excitado a 675 nm (nanómetros) de longitud de onda y emite a los 694 nm, por lo que su emisión puede ser captada por el canal de 700 nm del equipo Licor DNA Analyser. Este nucleótido ha sido empleado de rutina en las reacciones de amplificación para la generación de marcadores moleculares y posterior visualización en el equipo Licor, sin embargo, su síntesis se ha discontinuado.Se propuso por ello, optimizar el uso de un nucleótido fluorescente similar, el Cy5.dCTP (Cytiva, número de catálogo: PA55021) que es excitado a 649 nm y emite a 670 nm (Figura 1) y validar la utilización de la metodología de marcadores moleculares TRAP con su empleo.
