Evaluación de variación somaclonal en plantines micropropagados de la variedad de caña de azúcar RA 87-3

PERERA, M. F.; GARCÍA, M. G.; NOGUERA, A. S.; FILIPPONE, M. P. Y CASTAGNARO, A. P.

Tafí del Valle, Tucumán

Jornada; XXIII Jornadas Científicas; 2006

Asociación de Biología de Tucumán

El Proyecto Vitroplantas que lleva adelante la Estación Experimental Agroindustrial Obispo Colombres (EEAOC) desde fines del año 2000 produce anualmente 30.000 plantines saneados de caña de azúcar mediante termoterapia seguida de micropropagación “in vitro”. El objetivo de este Proyecto es lograr una rápida y eficiente multiplicación de variedades comerciales de caña de azúcar así como de clones promisorios aportados por el Programa de Mejoramiento genético de la EEAOC, garantizando la producción de “caña semilla” de calidad fitosanitaria y pureza genética controladas. Uno de los principales inconvenientes producidos en respuesta al estrés que ocasiona el cultivo “in vitro” es la variación somaclonal, que consiste en modificaciones en el número de cromosomas, en la estructura de los mismos (traslocaciones, deleciones, duplicaciones) o en la secuencia del ADN (mutaciones). La disponibilidad de perfiles moleculares que definan a cada genotipo permite asegurar la pureza genética de los plantines y detectar de manera precoz aquellas plantas que hayan sufrido algún tipo de alteración, antes que pueda evidenciarse alguna manifestación fenotípica como por ejemplo, un cambio morfológico o el incremento de la susceptibilidad a enfermedades. El objetivo de este trabajo es detectar si el aumento en la susceptibilidad a la enfermedad viral del mosaico en plantines micropropagados de la variedad de caña de azúcar RA 87-3, se debe a variación somaclonal. Para ello se recolectaron en la localidad de La Florida, departamento Cruz Alta, tallos de plantas sanas y enfermas con mosaico de la variedad RA 87-3. También se recolectaron tallos de las variedades RA 87-3, TUCCP 77-42, CP 65-357, LCP 85-384, TUC 95-24, TUC 97-7 y TUC 97-19 propagadas en forma convencional en la EEAOC. El ADN se extrajo a partir de tejido meristemático  utilizando un protocolo ya optimizado (Aljanabi et al.,1999). Para detectar la posible variación somaclonal se utilizó la técnica de AFLP (Vos et al., 1995), empleando 19 combinaciones de cebadores. Los productos de amplificación fueron separados en geles de poliacrilamida y visualizados por tinción con nitrato de plata. Con todas las combinaciones de cebadores utilizadas se detectaron diferencias entre variedades. Con siete combinaciones se obtuvieron perfiles diferenciales en dos de las dieciséis muestras evaluadas dentro de la variedad 87-3. Sin embargo no se encontraron diferencias entre plantas sanas y enfermas con mosaico, por lo que el incremento de susceptibilidad a la enfermedad observado podría deberse a factores ambientales, variaciones en el patógeno o cambios epigenéticos en la planta.