Cortes laminares de tejido (tissue slices): una alternativa para estudiar el mecanismo in vitro de fármacos de uso veterinario.

HERRERA DEL MESTRE, M.; VIRKEL, G.; LARSEN, K.E.; MATÉ, M.L.; LIFSCHITZ, A.; LANUSSE, C.

San Miguel de Tucuman

Congreso; XLIII Reunión Científica Anual SAFE.; 2011

SAFE

Existen diferentes técnicas in vitro para estudiar el metabolismo de xenobióticos. Los cortes laminares de tejido de alta precisión (tissue slices) ganaron popularidad a partir del desarrollo de los micrótomos (slicers) tipo Krumdieck®. Estos aparatos funcionan sumergidos en un buffer refrigerado y oxigenado y permiten obtener láminas de tejidos (hígado, riñón, etc.) de tamaño y espesor regular. El objetivo del presente trabajo fue validar la metodología para obtener e incubar cortes laminares de tejido hepático de rata utilizando un micrótomo Brendel/Vitron®. Cortes de 8 mm (diámetro) por 250-300 µm (espesor) fueron incubados durante 24 h con el fármaco antiparasitario albendazole (ABZ) en el medio de cultivo E de Williams y dentro de un incubador dinámico (Vitron®) bajo una atmósfera de O2/CO2 (95/5). Se obtuvieron muestras del medio de cultivo a las 0, 4, 8, 11 y 24 h para el análisis por HPLC. Se determinó la viabilidad de los cortes por histopatología y cuantificando la actividad lactato deshidrogenasa en el medio de cultivo. Las tasas de formación de los metabolitos ABZ-sulfóxido (1.15 ± 0.16 nmol/h) y ABZ-sulfona (0.23 ± 0.07 nmol/h) fueron lineales hasta las 24 h de incubación. Mediante el empleo de esta técnica es posible prolongar la viabilidad del tejido hepático manteniendo la arquitectura tisular. Esto representa una ventaja con respecto a otras técnicas in vitro permitiendo una representación más adecuada de los procesos metabólicos que se producen in vivo.