LA INTERACCIoN DE MCCJ25 CON INTERFASES FOSFOLIPiDICAS INDUCE CAMBIOS EN EL ENTORNO DE SUS TIROSINAS

AUGUSTO BELLOMIO; LUCRECIA CURTO; BEATRIZ F. DE ARCURI; BRUNO MAGGIO; JOSE M. DELFINO; ROBERTO D. MORERO

Mar del Plata, Pcia. de Buenos Aires. Argentina

Congreso; Congreso Conjunto de Sociedades Biomedicas. XXXVI Reunion Anual de la Asociacion Argentina de Farmacologia Experimental (SAFE), VI Jornadas de la Sociedad Argentina de Biologia (SABiologia), XXXIII Reunion Anual de la Sociedad Argentina de Biofisi; 2004

MccJ25 presenta la siguiente secuencia de aminoácidos [G1-G-A-G-H5-V-P-E-Y-F10-V-G-I-G-T15-P-I-S-F-Y20-G] y una estructura tridimensional inusual. El extremo N-terminal forma una unión amida con el carboxilo- del Glu8, formando un anillo de 8 residuos. La cola (Tyr9 a Gly21) se pliega sobre sí misma para enhebrarse dentro del anillo, formando una horquilla β. Las cadenas laterales aromáticas de Phe19 y Tyr20 traban la estructura impidiendo que el extremo C-terminal salga del anillo. Termolisina hidroliza las uniones entre Phe10 y Val11 y entre Gly12 e Ile13 obteniéndose un análogo de dos cadenas (MccJ25-Th19). Su estructura tridimensional determinada por RMN reveló que la región del anillo y de la cola C-terminal es idéntica a la de MccJ25. MccJ25-Th19 conserva la capacidad de inhibición dual en E. coli. En esta comunicación se presentan estudios de la interacción de MccJ25 y de MccJ25-Th19 con micelas mixtas de PCde yema de huevo (eggPC) y detergente (C12E10) y con capas monomoleculares de fosfolípidos. Los espectros de CD de los péptidos en la zona UV-cercana pero no en la zona lejana, realizados en presencia de micelas mixtas, presentan cambios que podrían interpretarse en términos de modificaciones en el micro-entorno de los aminoácidos aromáticos. Este resultado se correlaciona con los cambios observados en la fluorescencia intrínseca de los péptidos en presencia de las micelas y de SUV de eggPC. Los experimentos de monocapas revelaron que ambos análogos son capaces de penetrar en monocapas de eggPC y de fosfolípidos extraídos de E. coli a presiones comparables con la que existen en membranas biológicas. Estos resultados indicarían que MccJ25-Th19 interacciona con interfases fosfolipídicas de manera similar al de MccJ25.