Caracterización inmunológica de extractos polínicos locales.

BIANCHIMANO, A.; AZTIRIA, M. E.; GÁLVEZ, M.; BARREIRO, F. J.; MURRAY, M. G.; CARIGNANO, C.; PRAT, M. I.

Buenos Aires

Congreso; XXXIII Congreso Anual Asociación Argentina de Alergia e Inmunología Clínica; 2010

Asociación Argentina de Alergia e Inmunología Clínica

Los bioaerosoles (esporas de hongos y granos de polen) son causantes demostrados de enfermedades respiratorias alérgicas. El diagnóstico de éstas se basa en la historia clínica, exploración física, pruebas cutáneas y en la medición de anticuerpos del isotipo IgE. La identificación de los componentes antigénicos de los extractos polínicos alergénicos es un requisito indispensable para la estandarización y para el estudio de reacciones cruzadas entre ellos mismos. Los extractos que se emplean en el diagnóstico no contemplan todas las especies polínicas potencialmente alergógenas halladas en nuestra zona. El objetivo de este trabajo fue caracterizar antigénicamente extractos polínicos de especies espontáneas de amplia distribución en la zona de Bahía Blanca mediante electroforesis en geles de poliacrilamida (PAGE-SDS) y western blot. Se recolectaron granos de polen de Chenopodium album  (Cheal) y Beta vulgaris (Bevu) en las áreas con vegetación espontánea de la ciudad de Bahía Blanca. Las proteínas se extrajeron con PBS previa delipidificación con acetona en frío. El anticuerpo policlonal (anti-Bevu) se obtuvo inmunizando conejos con 100 μg de proteínas de Bevu con adyuvante de Freund completo. Los perfiles proteicos se determinaron por PAGE-SDS al 12 % y tinción con Comassie Brilliant Blue. La reactividad cruzada entre alergenos se estudió mediante western blott. Conclusión: La electroforesis mostró la presencia de numerosas bandas entre 14 y 97 kDa de peso molecular. Las bandas de mayor intensidad para Cheal fueron las de 45 y 97 kDa y para Bevu las de 21 y 45 kDa. El western blot se reveló con anti-Bevu y anti-Bevu previamente absorbido con proteínas de Cheal. En el primer caso se observó la presencia de bandas inmunorreactivas en la zona entre 14 y 97 kDa para ambos extractos, aunque la intensidad y el número de bandas observadas para Bevu fue mayor. En el segundo caso el espectro de bandas observadas para Cheal se redujo a la zona comprendida entre 30 y 45 kDa de PM, manteniéndose sin modificar para Bevu. Comprobamos que Bevu y Cheal presentan antígenos compartidos ente 17 y 97 kDa de PM. Probablemente los de 17 kDa correspondan a los denominados Cheal de Chenopodium. Demostramos la inmunogenicidad de las proteínas de Bevu ubicadas en el rango de 14-30 kDa, que se colorean débilmente pero que generan una intensa reacción en western blot.