Identificación de antígenos inmunodominantes para el desarrollo de formulaciones vacunales contra la criptosporidiosis bovina

TOMAZIC, MARIELA L; LOMBARDELLI, JOAQUÍN; POKLEPOVICH, TOMÁS; RODRIGUEZ, ANABEL E; GALARZA, ROXANA; TOLEDO, JONATHAN; TIRANTI, KARINA; FLORIN-CHRISTENSEN, MÓNICA; SCHNITTGER, LEONHARD

Ciudad Autónoma de Buenos Aires

Jornada; IX Jornadas y Reunión Anual de la Asociación Argentina de Inmunología Veterinaria; 2016

Asociación Argentina de Inmunología Veterinaria

El protozoo apicomplexa Cryptosporidium parvum es un agente causal de diarreas en bovinos y humanos. Dado que no existen vacunas, es esencial la búsqueda de antígenos para el desarrollo de formulaciones vacunales. Las proteínas ancladas a la superficie parasitaria por puentes glicosilfosfatidilinositol (GPI) están implicadas en la invasión, por lo que constituyen potenciales candidatos vacunales. En nuestro trabajo, el proteoma anclado por GPI de C. parvum fue identificado bioinformáticamente y tres de las proteínas, Cph1, Cpgp60 y Cpsubl, fueron expresadas en E.coli y purificadas por cromatografía de afinidad. Mediante inmunoblots, las proteínas fueron enfrentadas a sueros de bovinos (n=12) naturalmente infectados con Cryptosporidium sp., obtenidos entre los días 1 y 52 de vida. Se detectaron anticuerpos contra los tres antígenos en todos los bovinos analizados, demostrando que (i) las proteínas son expresadas en el parásito; (ii) tienen epitopes B conservados entre aislamientos y (iii) son inmunodominantes. La detección de anticuerpos específicos en etapas tempranas (1 a 11 días) sugiere la transferencia de anticuerpos calostrales. Sin embargo, los datos de refractometria no permitieron confirmar este tipo de transferencia. No se encontró asociación entre presencia de anticuerpos contra estos antígenos y diarrea. La conservación de epitopes B predichos fue confirmada para dos de los antígenos mediante amplificación de los genes codificantes por PCR a partir de ADN genómico de 5 aislamientos geográficos y 3 subgenotipos, seguido de secuenciación directa y análisis in silico. En etapas futuras se ensayarán estos antígenos en formulaciones vacunales contra la criptosporidiosis bovina.Financiamiento: FonCyt, PICT-2013-1708 y PICT 0695-2012; INTA, PNBIO-1131034 y PNSA-1115053; Fundación Universidad de Morón PID8-2015.