Aislamiento de levaduras de ambientes contaminados de la provincia de Tucumán, Argentina. Evaluación de la tolerancia al cobre

L. VILLEGAS; L.I.C DE FIGUEROA

Montevideo, Uruguay

Congreso; V Feria Congreso Latinoamericano de Biotecnología.; 2002

La actividad del hombre y los avances tecnológicos han producido muchos efectos adversos como la contaminación del medio ambiente con distintos metales pesados. Estos ambientes y los que contienen metales naturalmente, como los ecosistemas mineros, presentan una microflora limitada que es fácilmente aislable. En la provincia de Tucumán, Argentina, existen zonas de drenaje que contienen altas concentraciones de cobre debido a la descarga de desechos provenientes de minas. El cobre es un micro nutriente esencial requerido por prácticamente todos los organismos vivientes, para múltiples funciones bioquímicas y fisiológicas. Este metal funciona como cofactor o grupo prostético de numerosas enzimas involucradas principalmente en reacciones de óxido-reducción. La acumulación de excesivas concentraciones de cobre ha sido determinada como tóxica en todos los seres vivos. Dicha toxicidad se utiliza para el control de plagas en cultivos y como fungicida comercial. El principal objetivo del presente trabajo fue aislar levaduras capaces de tolerar condiciones desfavorables como las descriptas anteriormente y analizar su comportamiento frente a los metales. Se trabajó con muestras de suelo obtenidas en distintos puntos de un canal de drenaje. Las muestras se suspendieron en medio líquido que contenía 0,1 % de glucosa y 0,05 % de extracto de levadura para su enriquecimiento. Los Erlenmeyers se incubaron a 25 y 30ºC, 200 rpm, durante 72 h. Posteriormente estos cultivos fueron sembrados en placas Petri con YM-agar más una solución de antibióticos. Se obtuvieron 11 aislamientos, los cuales fueron repicados en YNB-glucosa-agar con distintas concentraciones de Cu2+ (1 a 10 mM). De esta manera se seleccionó la levadura más tolerante a Cu2+. Por sus características morfológicas y bioquímicas, la cepa RCL-11 podría ubicarse dentro del género Rhodotorula. Se realizaron ensayos en medio líquidos para analizar el comportamiento de la levadura en medios con distintas concentraciones de Cu2+. Se utilizó YNB-glucosa con Cu2+ en concentraciones de 0.1 a 5.0 mM. Las condiciones de cultivos fueron: 30ºC, 300 rpm, durante 72 h. Se sacaron muestras periódicamente y en ellas se analizó DO, consumo de glucosa y UFC. Estos estudios mostraron que la cepa toleró hasta 1mM de Cu2+, con un período de latencia muy largo. Dicha tolerancia se aumentó utilizando como inóculo un precultivo realizado con 1 mM de Cu2+. En estas condiciones toleró hasta 3mM, lo que muestra la capacidad adaptativa de este microorganismo ante la presencia del metal. El conocimiento de los mecanismos que poseen estos organismos para sobrevivir en presencia de metales permitirá la utilización de los mismos en beneficio del hombre, para utilizarlos en procesos tales como biorremediación.