Identificación de levaduras regionales tolerantes a cobre y cromo

L. B. VILLEGAS; J. RIVADENIERA; O. DELGADO; M.J AMOROSO; L.I.C. DE FIGUEROA

Tucumán, Argentina

Simposio; Simposio Internacional de Biotecnología. Aplicación en Alimentos, Salud y Medio Ambiente.; 2004

Cobre y cromo son micronutrientes esenciales requeridos para múltiples funciones bioquímicas y fisiológicas en prácticamente todos los organismos vivientes por sus funciones como cofactor o grupo prostético de numerosas enzimas y otras importantes reacciones. En elevadas concentraciones estos metales pesados son tóxicos. La acumulación en estas concentraciones de cobre y cromo en granos y vegetales cultivados en suelos contaminados llegan al hombre ocasionando severas enfermedades. Los microorganismos como las levaduras pueden adaptarse rápidamente a las constantes fluctuaciones del medio incluyendo aquellas condiciones desfavorables para organismos más complejos como lo son las elevadas concentraciones de metales. El principal objetivo del presente trabajo fue aislar levaduras capaces de tolerar condiciones desfavorables específicamente metales pesados y analizar su comportamiento en medio de cultivos con diferentes concentraciones de los mismos. Se trabajó con muestras de suelo contaminado con cobre extraídas en distintos lugares de un canal de drenaje de una mina y muestras de suelo contaminado con cromo obtenidas de piletones a cielo abierto de una curtiembre. Se seleccionaron los dos aislamientos más tolerantes a cobre y los dos más tolerantes a cromo. Estas fueron identificadas por técnicas moleculares secuenciando las regiones parciales de ADNr, NL-1 y NL-4 con la posterior confirmación por pruebas bioquímicas y fisiológicas. Se realizaron ensayos en medio de cultivos líquidos que contenían distintas concentraciones de los metales. Se utilizó el medio base nitrogenado para levaduras, YNB-glucosa con el agregado de 0,1; 0,2 y 0,5 mM de Cu2+; 0,7 y 1 mM de Cr6+. Las condiciones de cultivos fueron: 30ºC, 300 rpm, durante 80 h. Se sacaron muestras periódicamente y en ellas se analizó peso seco y concentración de metal residual. Estos estudios mostraron inhibición del crecimiento del 28-50% con 0,1mM; 40-50% con 0,2 mM y 50-60% con 0,5 mM de cobre mientras los ensayos realizados con cromo fueron de 55-58% con 0,7 mM y de 78-86% con 1 mM. El porcentaje de remoción de los metales fue inversamente proporcional a la concentración del mismo existente en el medio. El conocimiento del comportamiento de estos organismos para sobrevivir en presencia de metales y la capacidad de remoción de los mismos permitirá su utilización en beneficio del hombre en futuros procesos de biorremediación.