Análisis de las Modificaciones Bioquímicas en la Zona Pelúcida de Ovocitos Bovinos Inmaduros y Madurados in Vitro: Un Estudio por Microscopía RAMAN

RISO,G; ALVAREZ, RMS; BARRERA, AD; GARCÍA, DC; DORA C. MICELI; MARIELA ROLDÁN OLARTE

San Miguel de Tucumán

Jornada; 3ra Reunion Conjunta de Sociedades de Biología de Argentina y XXXII Jornadas Científicas de la Asociación de Biología de Tucumán; 2015

3ra Reunion Conjunta de Sociedades de Biología de Argentina y XXXII Jornadas Científicas de la Asociación de Biología de Tucumán

La microscopía Raman es una técnica espectroscópica que brinda información valiosa sobre la conformación estructural de las células. Su aplicación al estudio de la zona pelúcida (ZP) de ovocitos bovinos, permite el análisis de los datos espectroscópicos vibracionales relacionados con la estructura secundaria de las proteínas y la naturaleza de los glicosaminoglicanos. De este modo es posible detectar cambios bioquímicos en la estructura de la ZP luego de la maduración del ovocito. Las diferencias espectrales se interpretan en términos de las alteraciones estructurales que ocurren en la ZP como consecuencia del proceso de maduración in vitro (MIV)En este trabajo, se compararon los espectros Raman de la ZP de ovocitos inmaduros con los obtenidos de los madurados in vitro, empleando una línea de excitación láser de 780 nm. Se propuso una asignación tentativa de la mayoría de las bandas que aparecen en el rango espectral 1900-700 cm-1, entre las que se destacan las bandas Amida I y Amida III del esqueleto proteico y algunas bandas características de los aminoácidos Trp, Tyr y PhH. También se identificaron los grupos COH de los glúcidos y bandas correspondientes a la deformación CH2 de las proteínas. Las diferencias espectrales más significativas se relacionaron con las bandas Amida evidenciando modificaciones que afectan al contenido relativo de conformaciones de hélice  y hoja .Los resultados obtenidos indican que la microscopía Raman constituye un método eficiente para caracterizar los cambios estructurales en el gameto femenino. El conocimiento preciso de estas modificaciones es de vital importancia para asegurar la calidad de los ovocitos MIV empleados en la producción in vitro de embriones bovinos.