“Sitios específicos de unión de progesterona a fracción celular rica en membrana plasmática de oviducto y ovario”.

PERALTA LUISA, ROLDÁN MARIELA, MICELI DORA C.

Villa Giardino, Cordoba, Argentina

Congreso; XXXIII Reunión Anual de SAIB (Sociedad Argentina de Investigaciones Bioquimicas); 1997

Sociedad Argentina de Investigaciones Bioquimicas

SITIOS ESPECÍFICOS DE UNIÓN DE PROGESTERONA A FRACCIÓN CELULAR RICA EN MEMBRANAS PLASMATICAS DE OVIDUCTO Y OVARIO   Luisa Peralta, Mariela Roldán y Dora C. Miceli   Se estudió la presencia de sitios específicos de unión de progesterona en fracción enriquecida con membrana plasmática de células de ovario y oviducto de cerdo. Las membranas fueron obtenidas mediante centrifugación a 95.000 g durante 1 h en colchón de sacarosa al 41%. La velocidad de asociación y disociación de progesterona tritiada a sitios específicos fue medida por el método de desplazamiento con hormonas frías usando filtros (retención > 1,5 µm) para medir la radiactividad de las membranas. Las fracciones enriquecidas en membranas plasmáticas de ambos órganos presentan sitios de unión específicos, reversibles, saturables y dependientes de la temperatura. En la fracción oviducal la unión de progesterona se realiza aparentemente a través de dos tipos de sitios diferentes e independientes. Uno de mayor afinidad y menor capacidad (KD= 8,69 x 103 nM y Bmax= 52 fmol/mg prot.) y el otro con menor afinidad y mayor capacidad relativa (KD=130 x 103 nMy Bmax= 401 fmol/mg prot.). En cambio, el ovario presenta un solo tipo de unión (KD= 9,6 x 103 nM y Bmax= 383 fmol/mg prot.). Los estudios sobre especificidad de binding demuestran que en oviducto la progesterona presenta una elevada inhibición competitiva (IC50= 39,8 nM) al igual que estradiol (IC50= 56 nM), en cambio es menor para R5020 (IC50= 3.200 nM) y para corticosterona (IC50= 3.200 nM). En ovario los sitios de unión parecen ser más específicos para la progesterona (IC50= 28,2 nM), corticosterona compite en menor medida (IC50= 501 nM). Estradiol y R5020 no compiten. Estos resultados indicarían que tanto el oviducto como el ovario presentan sitios de unión con diferente afinidad por la progesterona; el sitio de mayor afinidad de oviducto presenta una constante de disociación similar al sitio de unión detectado en ovario y sería específico para progesterona y corticosterona, esteroides C21 con estructura química casi idéntica. El sitio con menor afinidad para progesterona sería un sitio con mayor afinidad por esteroides C18.