"Residuos de N-acetil galactosamina y galactosa participan en la formaci¨®n de reservorios esperm¨¢ticos en el oviducto de llama¡±

APICHELA, SA; JIMENEZ DIAZ, MA; VALSZ GIANINET, JN; ROLDAN OLARTE, EM; MICELI, DC

Buenos Aires

Jornada; I Jornadas Internacionales del Instituto de Investigaci¨®n y Tecnolog¨ªa en Reproducci¨®n Animal; 2008

Instituto de Investigacion y Tecnologia en Reproduccion Animal

En el proceso de adhesion de espermatozoides a celulas epiteliales del oviducto, moleculas tipo lectinas de la membrana espermatica, reconocen carbohidratos especificos de la superficie oviductal. El carbohidrato involucrado es diferente segun la especie. Nuestro objetivo fue caracterizar los residuos glicosilados del oviducto de llama y determinar cuales de estos carbohidratos participan en la adhesion oviducto-espermatozoide, detectados mediante lectinhistoquimica. Union utero-tubal (UUT), istmo y ampula, fueron fijados e incluidos en parafina. Secciones de 7 um se incubaron con diferentes lectinas (WGA, WGAs, UEA, DBA, RCA 120, Con A, PSA, LCA, GSL y SJA) conjugadas con FITC o Rodamina y se observaron por Microscopia Confocal L¨¢ser. Se realizaron ensayos de inhibicion competitiva in vitro: espermatozoides obtenidos por vagina artificial fueron incubados 20 minutos con ug/ml de glucosa, manosa, galactosa o N-acetil galactosamina en medio TL-sp. Luego se co-incubaron con explanaos de celulas epiteliales de la UUT durante una hora y fueron fijados, coloreados y fotografiados. Se determino  el area de cada explanto (ImagePro software) y el indice de Union (IU) (espermatozoides adheridos/0.1 mm2de explanto). Los carbohidratos presentes son similares en ampula, istmo y UUT. Se observaron abundantes residuos terminales de a-manosa, a- glucosa, N-acetil glucosamina y acido sialico en la superficie de la mucosa en forma aleatoria. No se detecto ¦a-fucosa. Los IU para los tratamientos con galactosa y N-acetil galactosamina resultaron significativamente menores al control. Al incubar espermatozoides eyaculados con N-acetil galactosamina o con galactosa FITC-conjugadas se observo que estos unen ambos azucares, no asi los espermatozoides epididimales. Concluimos que el sistema de reconocimiento de carbohidratos de la superficie oviductal participa en el proceso de adhesion al epitelio de la UUT, siendo galactosa y N-acteil galactosamina los principales azucares involucrados en esta adhesion. La molecula tipo lectinas que reconoce estos azucares seria aportada al espermatozoide por el plasma seminal durante la eyaculacion.