INTERACCIÓN ENTRE LAS VÍAS DE SEÑALIZACIÓN DE MCP1/CCR2 Y AREG/EGFR EN LA CASCADA OVULATORIA

CONTE J; TELLECHEA ML; JAITA G; PELUFFO M

CABA

Congreso; XXIII JORNADAS ANUALES DE LA SOCIEDAD ARGENTINA DE BIOLOGÍA ? Evolución, desarrollo y cambio tecnológico; 2021

Sociedad Argentina de Biología

El pico de LH (hormona luteinizante) previo a la ovulación, activa una red de señalización compleja que induce procesos críticos para la fertilidad, como la expansión de las células del cumulus y el reinicio de la meiosis. En particular, ha sido descripto que los miembros de la familia del EGF (factor de crecimiento epidérmico), como la AREG (anfirregulina), median o sinergizan la acción de la LH en la cascada ovulatoria. Recientemente, demostramos que el sistema MCP1/CCR2 (proteína quimioatrayente de monocitos 1/ receptor de quimoquina 2 con motivo C-C) incrementa los niveles de ARNm de genes clave de la cascada ovulatoria in vitro. Además, observamos que la inhibición de CCR2 reprime la estimulación de los niveles de ARNm de estos genes desencadenada por las GNT (gonadotrofinas) y la AREG. El objetivo del presente trabajo fue evaluar la participación del camino de señalización de AREG/EGFR en la cascada ovulatoria utilizando como modelo al gato doméstico (Felis catus) y confirmar una posible interacción con la vía de señalización de MCP1/CCR2. Para evaluar dicho objetivo, se extrajeron quirúrgicamente los ovarios de gatas domésticas adultas (n=16) en distintos estadios del ciclo estral durante los meses de actividad sexual, y se aislaron los COC (complejos ovocitos-células del cumulus) de folículos antrales bajo lupa. Luego, se cultivaron durante 3h (tiempo en el cual incrementan los niveles de los genes periovulatorios en nuestro sistema) con GNT en presencia o ausencia de un inhibidor de EGFR (Lapatinib, 1 µM), más la adición de la quimoquina MCP1 (10 ng/ml) para evaluar un posible rescate, o potenciamiento, del bloqueo del receptor de EGFR en la expresión de genes periovulatorios. Finalizado el cultivo, se realizó la extracción del ARN total de los COC individualmente (n=42) y se analizó la expresión del ARNm de los genes periovulatorios (HAS2, AREG, TSG6, PTX3) mediante RT real-time PCR, utilizando sondas TaqMan específicas. Observamos que el inhibidor de EGFR fue capaz de prevenir o interferir (p0.05). De manera interesante, MCP1 fue capaz de revertir (p0.05). En conclusión, nuestros resultados confirman la importancia de la vía de señalización del EGFR en los eventos periovulatorios en la gata doméstica. Así mismo, corroboran la interacción entre los caminos de señalización de la vía MCP1/CCR2 y AREG/EGFR en la cascada ovulatoria, indicando que CCR2 se encuentra río abajo de la activación del EGFR.