Unión a albúmina sérica humana de nuevos derivados de zidovudina con actividad anti HIV: Método experimental y teórico

QUEVEDO, M.A.; MORONI, G.N.; BRIÑÓN, M.C.

Florianópolis - Brasil

Congreso; Farmapolis 12a Ed.; 2004

Farmapolis

Objetivos Zidovudina (AZT) fue la primera droga aprobada para tratar el Síndrome de Inmunodeficiencia Adquirida (SIDA), y si bien ha demostrado extensamente su utilidad clínica, se han informado frecuentes efectos adversos asociados a sus propiedades farmacocinéticas subóptimas. Entre ellas se encuentra la escasa unión a proteínas plasmáticas, en particular a albúmina sérica humana (ASH). En nuestro grupo de trabajo se han sintetizado por diferentes metodologías seis nuevos derivados de AZT tendientes a incrementar la afinidad por ASH. Para evaluar dicho resultado se realizaron: 1) determinaciones experimentales de la afinidad de los nuevos derivados a ASH, y 2) métodos de docking computacional, comparándose ambas metodologías.   Métodos Metodología experimental: Se incubaron soluciones de droga y ASH a 37 °C y a distintas concentraciones, separando las fracciones de droga libre y unida mediante dispositivos  de ultrafiltración Centrifree (MPS-1 Amicon). Se cuantificó la droga libre por HPLC (detección UV a 267 nm), calculando el porcentaje de droga unida y su correspondiente constante de afinidad. Mediante un ensayo de competición se identificó el sitio de unión en la molécula de ASH. Análisis teórico:  Partiendo de las estructuras moleculares minimizadas y de la conformación tridimensional de ASH (obtenida por cristalografía), se realizaron los cálculos de docking empleando el software Autodock 3.0, estableciendo un modelo de unión ligando-ASH,  con sus respectivas energías de docking e interacciones intermoleculares presentes.   Resultados Los nuevos derivados sintetizados presentan afinidad hacia ASH con porcentajes de unión entre 13,6 y 47%, exhibiendo un considerable aumento respecto de la fracción unida de AZT (12%). Los valores de energía de docking obtenidos a partir de cálculos teóricos, demostraron buena correlación con los datos experimentales.   Conclusiones El modelo hallado describe adecuadamente la unión de los nuevos derivados a la ASH, pudiéndose aplicara al diseño de nuevos derivados para lograr una máxima afinidad por la proteína.