Inducción de estrés de retículo endoplásmico, autofagia y muerte celular por Bortezomib en los estadios larvarios de Echinococcus granulosus.

MARÍA CELESTE NICOLAO; ANDREA CARINA CUMINO

Mar del Plata

Congreso; LX Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica, Reunión Sociedad Argentina de Fisiología; 2015

LX Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica, Reunión Sociedad Argentina de Fisiología

El bortezomib (Bz) es un ácido borónico dipeptídico, que inhibe la actividad proteolítica de la subunidad β5 del proteasoma 26S e induce la muerte celular en varios tumores celulares. Bz es un fármaco aprobado por la FDA, cuyo mecanismo de citotoxicidad aún no está completamente dilucidado. En este trabajo, se ha determinado el impacto de la inhibición in vitro del proteasoma sobre la viabilidad de los estadios larvarios de Echinococcus granulosus (Eg, agente causal de la hidatidosis humana) y su relación con la autofagia. El Bz inhibe la viabilidad de los protoescólices (PTS) y metacestodes (MTC) de manera dosis dependiente, observándose un efecto significativo con 5 μM y 0,1 μM luego de 24 h, respectivamente. Además, se encontró un efecto sinérgico sobre la viabilidad de ambos estadios larvarios utilizando una combinación de Bz más el inductor autofágico rapamicina (Rp). Mediante RT-PCR y qPCR se comprobó la inducción de estrés de retículo endoplásmico en PTS tratados con Bz, observándose sobreexpresión del ARNm de las chaperonas calnexina y grp-78 respecto a los controles. La inducción de autofagia fue estudiada mediante expresión de genes (atg6, atg8, atg12 y atg16) por RT-PCR y qPCR en ambos estadíos larvarios encontrándose un aumento de la expresión de estos genes en PTS y de atg-8 en MTC. Además mediante ensayos de Western Blot e inmunodetección in toto se determinó la sobreexpresión de la proteína marcadora de autofagia LC3 en PTS tratados con Bz respecto a los controles. La localización de dicha proteína fue observada en el tegumento, ventosas y en el sistema excretor de PTS. Estos resultados muestran que, el bloqueo del proteasoma y la inhibición del plegamiento de las proteínas podrían dar lugar a estrés del retículo endoplásmico, favoreciendo la muerte celular por autofagia en los estadios larvarios de Eg, lo que contribuye a la identificación de nuevas dianas terapéuticas para la quimioterapia de la hidatidosis.