El calcio y la calmodulina como mediadores comunes de la acción citotóxica de diferentes drogas en Echinococcus granulosus.

CUMINO A.C., DENEGRI G.M.

Chascomús, Argentina (11-13 Noviembre)

Congreso; XXII Reunión Científica Anual SAP; 2007

Sociedad Argentina de Protozoología

En los eucariotas inferiores, el calcio interviene en procesos fisiológicos (contracción, motilidad, modulación enzimática, transporte iónico, diferenciación celular, transcripción de genes y actividad del citoesqueleto) y actúa en la transducción de señales liberándose de depósitos intracelulares y secuestrándose activamente para lograr una adecuada actividad metabólica del ión fosfato. Además ellos tienen proteínas citoplasmáticas capaces de unir calcio y actuar como reguladoras citosólicas, entre ellas la calmodulina (CaM), capaz de regular enzimas, canales iónicos y proteínas del citoesqueleto. En el caso particular de Echinococcus granulosus, el calcio forma depósitos semicristalinos junto con IP6 y proteínas (EgCaBP) muy abundante en los corpúsculos calcáreos de la fase larvaria y en las membranas quísticas pero se desconoce función fisiológica. En este trabajo se determinó la [Ca2+]i mediante indicadores fluorescentes (Flu3AM y Fura2) en estadíos larvarios de Echinococcus granulosus (90-120 nM) a través de microscopía confocal. En el tratamiento farmacológico de protoescólices en cultivo, todos los benzimidazoles metil-carbamato y derivados de lactonas macrocíclicas analizados mostraron aumentos en la [Ca2+]i. La amplitud y duración de estos cambios tempranos se correlacionaron con las alteraciones bioquímicas-moleculares (disminución de los niveles de glucógeno y de la expresión de malato-deshidrogenasa) y morfológicas observadas en los protoescólices. Fueron determinados los niveles de expresión de CaM frente a los diferentes antihelmíticos, describiéndose por primera vez el sistema calcio/CaM en E. granulosus. Además, fueron analizados los niveles de expresión de las proteínas EgCaBP (proteína de unión de Ca asociada a los corpúsculos calcáreos) y EgAFFP (proteína de unión a actina que promueve su depolimerización) y se relacionaron con las modificaciones del Ca2+ libre. Interpretar los cambios globales de [Ca2+]i requiere comprender mecanismos homeostáticos aún desconocidos para estos parásitos, debiéndose estudiar la regulación de [Ca2+]/CaM para comprender la actividad de varias drogas antihelmíticas de uso generalizado.