Detección y caracterización de enterovirus y hepatitis A en el Riachuelo y Río de la Plata

CISTERNA, D.; LEMA, C.; RIVIELLO LÓPEZ, G.; FREYRE, L.; MARTINEZ, L.; TORRES, C.; MBAYED, V.; FREIRE, M. C.

Buenos Aires

Congreso; IX CONGRESO ARGENTINO DE VIROLOGÍA; 2008

Sociedad Argentina de Virología

Los enterovirus (EV) y hepatitis A (HAV) se excretan por heces y se han detectado en una amplia variedad de fuentes de agua. La presencia de estos virus en el medio ambiente implica un riesgo potencial para la salud humana dado que pueden causar casos esporádicos o brotes de distintas enfermedades aún cuando se ingieren en bajas concentraciones. El objetivo de presente trabajo fue detectar y caracterizar la presencia de EV y HAV en dos ríos de características ambientales distintas: el Riachuelo (altos niveles de contaminación bacteriológica: coliformes fecales: 3.5 107 NMP/ml) y Río de la Plata (bajos niveles de contaminación: 5.5 104 NMP/ml). Se analizaron 57 muestras de 2 litros de agua recolectadas entre octubre de 2005 y febrero de 2006. Se recolectaron 30 muestras en el Riachuelo en tres localizaciones: La Noria (9), Cildañez (10), Uriburu (11). En el Río de la Plata, se tomaron 27 muestras: Quilmes (10), Aeroparque (10) y Tigre (7). Las muestras fueron concentradas por filtración y elución sobre filtros electronegativos. El genoma de HAV se detectó por nested-PCR de la región genómica de la proteína VP1. Algunas de estas muestras fueron secuenciadas de manera directa sobre el producto de PCR amplificado. Se realizó un análisis filogenético para determinar su relación con aislamientos previos de este virus proveniente de pacientes con hepatitis aguda, residentes en la Ciudad de Buenos Aires o conurbano. La búsqueda de EV se realizó mediante RT-nested PCR específica para EV y aislamiento en cultivo de células Rd y L20b (específica para poliovirus). La tipificación de los aislamientos virales se realizó por secuenciación nucleotídica parcial de la proteína VP1 y análisis filogenético. En el Riachuelo se detectó HAV en 27 (90%) de 30 muestras: La Noria, 9 (100%), Cildañez, 8 (80%) y Uriburu, 10 (91%). Todas las muestras fueron positivas para EV. En el Río de la Plata, los niveles de HAV detectados fueron significativamente inferiores. 1/27 (3.7%) y solo se detectó en el Tigre. Enterovirus se detectó en 15/27 (55%): Quilmes, 4 (26.7%), Aeroparque, 5 (33.3%) y Tigre, 6 (40%). El análisis filogenético de 4 muestras secuenciadas indica que los virus de HAV pertenecen al sub-genotipo IA. La tipificación de los aislamientos de EV mostró la presencia de diversos serotipos de EV: en el Riachuelo: Echovirus (E) 6, 7, 11 y 19, virus coxsackie B1, B3 y B5 y poliovirus Sabin 2 y 3. Una muestra reveló la presencia de enterovirus bovino (BEV). En dos muestras de agua se identificaron 2 serotipos diferentes de EV cuando se realizó la secuenciación genética con el iniciador sentido o antisentido: E6 y E7 y E11 y E19. En el Río de la Plata solo se detectó E6 y E19. Los resultados obtenidos revelan altos niveles de contaminación viral en el Riachuelo y una prevalencia menor en el Río de la Plata. La caracterización de HAV reveló el genotipo IA, el único tipo genético relevado en estudios epidemiológicos moleculares previos de individuos infectados. La tipificación molecular de los aislamientos de EV puso en evidencia la circulación de serotipos endémicos asociados a casos esporádicos de meningitis aséptica y la presencia simultánea de al menos dos serotipos en las muestras de agua. Por último, el aislamiento de BEV reveló la contaminación no solo humana sino también de origen animal. CONCLUSION: En conclusión, la investigación de HAV y EV en aguas superficiales, es útil en la identificación de sus variantes genéticas circulantes en la población y en el monitoreo de la contaminación humana y animal de estos cursos de agua.