DETECCIÓN Y CARACTERIZACIÓN DEL VIRUS DE HEPATITIS A EN MUESTRAS AMBIENTALES

TORRES, C.; LEMA C.; LÓPEZ RIVIELLO, G.; GUIRADO, A.; BOSSIO, J.C.; FREIRE, MC,; CISTERNA D,; CAMPOS, R.H.; MBAYED, V.A.

Valle Hermoso, Pcia de Córdoba

Otro; XXVI Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Virología.; 2006

Sociedad Argentina de Virología

Los virus entéricos, por su resistencia a condiciones ambientales adversas y a tratamientos convencionales de desinfección constituyen un importante problema sanitario vinculado a la transmisión hídrica. La calidad microbiológica de las aguas se evalúa mediante indicadores bacterianos, como coliformes, pero se ha demostrado que en ocasiones el cumplimiento de estos estándares no correlaciona adecuadamente con la ausencia de patógenos virales. Los distintos agentes virales involucrados pueden causar cuadros clínicos diversos como gastroenteritis, meningitis y hepatitis. Entre ellos, el virus de hepatitis A (HAV) es el responsable de infecciones endémicas en este país. El objetivo de este trabajo fue investigar la presencia de este virus (HAV) en muestras ambientales y caracterizarlo molecularmente. Se analizaron muestras de aguas del Riachuelo (puntos de muestreo: Puentes La Noria y Uriburu y Arroyo Cildañez) y de la costa del Río de la Plata (puntos de muestreo: Tigre, Aeroparque y Quilmes) recolectadas quincenalmente durante el período comprendido entre los meses de octubre de 2005 y febrero de 2006. Las muestras fueron concentradas por filtración y elución sobre filtros electropositivos. El genoma de HAV se detectó por nested-PCR de la región genómica de la proteína VP1. Algunas de estas muestras fueron secuenciadas de manera directa sobre el producto de PCR amplificado. Se realizó un análisis filogenético para determinar su relación con aislamientos previos de este virus proveniente de pacientes con hepatitis aguda, residentes en la Ciudad de Buenos Aires o conurbano. La presencia del virus pudo ser establecida en sucesivos muestreos realizados en los 3 puntos sobre el Riachuelo. A pesar de la mayor dilución que sufriría el virus en aguas del Río de la Plata, éste también pudo ser detectado en muestras recolectadas en la costa de Tigre. En cambio, no se pudo establecer su presencia en las regiones del Río de la Plata correspondiente a Aeroparque y Quilmes. Estos resultados tienen una buena correlación con la detección de enterovirus (ya sea por cultivo o PCR) sobre algunas de estas muestras. El análisis filogenético de 4 muestras secuenciadas indica que los virus pertenecen al sub-genotipo IA, que fue el único tipo genético relevado en estudios epidemiológicos moleculares previos de individuos infectados. Algunas de las muestras de este estudio se encuentran genéticamente relacionadas a un cluster de aislamientos humanos locales. Las otras forman un cluster separado. Cabe destacar que 2 muestras sucesivas de una misma ubicación geográfica no presentan la misma secuencia. Dada la gran estabilidad genética característica de este virus, esto podría estar reflejando la co-existencia de distintas cepas del virus en una muestra, en proporciones variables a lo largo del tiempo. Esto propicia una re-evaluación de los métodos de tipificación viral en muestras ambientales con mezclas complejas de virus.