La piel del anfibio Rhinella arenarum y su potencial en la Enfermedad de Alzheimer como fuente de productos naturales multiobjetivo

RIETMANN, ALVARO JOSE; SPINELLI, ROQUE; SIANO, ALVARO

Tucuman

Jornada; Jornadas de Ciencias Quimica y Biológicas; 2020

La piel de los anfibios es poseedora de una gran diversidad de compuestos biológicamente activos, entre los cuales se encuentran los péptidos. El aislamiento, identificación y síntesis de estos ha llevado al desarrollo de agentes terapéuticos con diversas aplicaciones en salud humana. La enfermedad de Alzheimer (EA) es la más mortal y de mayor incidencia de las enfermedades neurodegenertivas. Si bien, su origen no esta del todo vislumbrado, es conocido que se trata de una enfermedad multifactorial que involucra diversas rutas patológicas. Los blancos terapéuticos para su tratamiento incluyen a las enzimas acetilcolinesterasa (AChE), butirilcolinesterasa (BChE) y la monoamino oxidasa-B (MAO-B), además del estrés oxidativo y el desbalance de iones metálicos.ObjetivosEvaluar la actividad de la especie Rhinella arenarum (Ra) (Anura: Bufonidae) como fuente de péptidos naturales multiobjetivos para los blancos patológicos de la EA.Materiales y métodosLos extractos fueron obtenidos mediante dos técnicas diferentes: extracción con solventes (ES), y estimulación eléctrica transcutánea (EET). Posteriormente se purificaron mediante RP-HPLC. Se determinó la actividad inhibitoria de las enzimas AChE, BChE y MAO-B, además de la capacidad antioxidante y quelante del Fe2+. Por otro lado, se evaluó la actividad hemolítica de las muestras. Las muestras fueron caracterizadas mediante la prueba de ninhidrina y Dragendorff. Todo fue realizado siguiendo metodologías especificas reportadas en literatura.ResultadosDe los extractos completos obtenidos por los dos métodos extractivos se purificaron seis fracciones para ES y siete para EET; todas numeradas mediante numeración arábiga según su orden de elución. El análisis de la actividad biológica demostró para ambas colinesterasas una potente actividad inhibitoria en los purificados de EET, con valores de IC50 entre 114 y 474 µg/ml, para AChE, y menores a 18 µg/ml para BChE. La actividad de MAO-B fue disminuida por todos los purificados, registrándose una fuerte inhibición para las primeras fracciones de ambos métodos extractivos, con valores de IC50 entre 117 y 275 µg/ml. Por otro lado, las muestras resultaron extremadamente antioxidantes, siendo las fracciones EET-I, EET-II y EET-III las más activas (IC50 entre 5 y 6 µg/ml). En lo que respecta a la capacidad quelante, las fracciones ES-I y ES-II demostraron ser las más activas, mientras que una moderada actividad fue observada para EET-III y EET-VII. Notablemente, las fracciones purificadas más activas no resultaron hemolíticas. Por último, la caracterización analítica denotó la presencia de péptidos y alcaloides en las muestras.ConclusionesLa especie Ra es una fuente de compuestos naturales capaces de modular simultáneamente cinco vías patológicas de la EA. Resultados más potentes los compuestos obtenidos mediante el método extractivo EET.